Аденоиды мкб: Ошибка 404. Файл не найден

Опубликовано автором

Содержание

Головная боль напряжения — цены и запись на консультацию врача отделения неврологии «ИАКИ» ЦАО

Головная боль напряжения (ГБН) — одна из наиболее распространенных форм первичной головной боли, проявляющаяся болевыми эпизодами продолжительностью от 30 минут до нескольких суток.

Внимание! Головная боль – индикатор целого ряда различных проблем, от незначительных до серьезных (например, опухоль головного мозга).

ИНСТИТУТ АЛЛЕРГОЛОГИИ И КЛИНИЧЕСКОЙ ИММУНОЛОГИИ располагает:

  • спектром услуг для точной диагностики заболеваний
  • специальными программами лечения
  • курсами эффективных процедур, проводимые специалистами нашего института более 10 лет
  • консультации проводят врачи, имеющие ученые степени.

При выявлении сопутствующих заболеваний проводятся консультации со специалистами смежных областей (оториноларингологи, эндокринологи, неврологи, гастроэнтерологи, дерматовенерологи), консилиумы с Докторами медицинских наук.

Симптомы

Внимание! Самолечение и злоупотребление обезболивающими может привести к хронизации процесса!

  1. Головные боли длительностью от 30 минут до 7 дней.
  2. Рисунок боли по типу «обруча» или «каски».
  3. Как минимум два из следующих признаков:
    1. двухсторонняя локализация
    2. давящий/сжимающий/не пульсирующий характер 
    3. легкая или умеренная интенсивность
    4. боль не усиливается при обычной физической активности (ходьба, подъем по лестнице)
  4. Оба из следующих признаков:
    1. отсутствует тошнота или рвота (может появляться анорексия)
    2. только один из симптомов: фото-или фонофобия (редко развиваются одновременно)
  5. Облегчение боли при положительных эмоциях и в состоянии психологического расслабления; усиление на фоне эмоциональных переживаний.
  6. Болезненность и напряжение мышц шеи и затылка.
  7.  Повышенная тревожность, лабильный  фон настроения, плохое качество ночного сна,   апатия или    раздражительность.

Головная боль напряжения в классификации головной боли по МКБ 10

  • G 44.0 Синдром «гистаминовой» головной боли
  • Хроническая пароксизмальная гемикрания
  • «Гистаминовая» головная боль: хроническая. эпизодическая
  • G 44.1 Сосудистая головная боль, не классифицированная в других рубриках
  • Сосудистая головная боль БДУ
  • G 44.2 Головная боль напряженного типа
  • Хроническая головная боль напряжения
  • Эпизодическая головная боль напряжения
  • Головная боль напряжения БДУ
  • G44.3 Хроническая посттравматическая головная боль
  • G44.4 Головная боль, вызванная применением лекарственных средств, не классифицированная в других рубриках
  • G44.8 Другой уточненный синдром головной боли

Причины

Внимание!
Самолечение и злоупотребление обезболивающими может привести к хронизации процесса!

Патогенез  головной боли напряжения по прежнему неясен. Однако, определены факторы, которые ее вызывают:

  1. Психогенный фактор (тревога, стресс).
  2. Злоупотребление обезболивающими.
  3. Мышечное напряжение
  4. Эмоциональный стресс и психические нарушения (депрессия и тревога, которые  поддерживают мышечное напряжение, приводя к персистированию( возвращению) боли ).

Диагностика

Как правило установить диагноз головной боли напряжения не составляет труда, но подтверждение диагноза является трудоёмким процессом. Для этого необходимо провести ряд диагностических исследований, которые позволяют не только подтвердить заболевание, но и выяснить степень его тяжести, а также основную причину, что качественно улучшает дальнейшее лечение больного. Диагностические мероприятия необходимы также для проведения дифференциального диагноза, исключения других заболеваний , имеющих сходную картину головной боли.

Лечение

В лечении головной боли напряжения применяется комплексный подход:

  1. Стабилизация эмоционально состояние пациента.
  2. Устранение дисфункции перикраниальных мышц.
  3. Предотвращению лекарственного абузуса (одна из форм хронической ежедневной головной боли, возникающая обычно как осложнение существовавшей ранее первичной головной боли (мигрени или головной боли напряжения) в результате регулярного или частого приема анальгетиков, нестероидных противовоспалительных средств и др. препаратов)

Задача  такого лечения —  уменьшение болевого и мышечно-тонического синдрома, предотвращение  превращения эпизодической головной боли напряжения в хроническую головную боль.

Для этого используются медикаментозные и немедикаментозные методы лечения головной боли напряжения применяют акупунктуру, мануальную терапию, массаж и т.д.

Внимание!

Подбор лекарственной терапии должен производиться индивидуально с учетом тяжести течения заболевания, наличия сопутствующих заболеваний, возраста пациента и риска возможных побочных эффектов.

Просим Вас не заниматься самолечением на основании данных сети Интернет!

Телефон отделения: +7 (495) 695-56-95

Информационный блок для пациентов

Профилактические мероприятия

Со стороны пациента также важно соблюдать некоторые рекомендации:

  • Спать не меньше 7 часов в сутки.
  • Отход ко сну должен быть не позднее 11 вечера. Именно в это время и до 1 часа ночи организм восстанавливает потраченные за день силы.
  • Постараться организовать для себя своевременное здоровое питание.
  • Делать перерывы, если работа монотонная и неподвижная.
  • Заняться спортом и проявлять больше активности. 
  • Прогулки на свежем воздухе должны осуществляться в любую погоду.

Оренбургская областная клиническая больница

Мы рады приветствовать вас на страницах официального сайта нашей больницы!

Государственное автономное учреждение здравоохранения «Оренбургская областная клиническая больница» (ГАУЗ «ООКБ») свыше 140 лет занимает лидирующее место в здравоохранении области. Благодаря деятельности сотрудников нашего учреждения и бережному отношению к традициям, заложенным нашими предшественниками, мы продолжаем повышать качество и эффективность медицинской помощи. Мощная материально-техническая база, высокий кадровый потенциал, использование эффективных методов диагностики и лечения дают возможность оказывать специализированную, в том числе высокотехнологичную медицинскую помощь населению Оренбургской области и других регионов.

Мощность стационара 933 койки. С 2007 года ГАУЗ «ООКБ» входит в перечень учреждений, оказывающих высокотехнологичную медицинскую помощь по федеральным квотам. С 10 января 2013 в нашей больнице работает региональный сосудистый центр на 120 коек, а 1 января 2014 года на базе нефрологического отделения начал работать областной нефрологический центр.

Мощность консультативной поликлиники 600 посещений в смену, приём ведется по 28 специальностям.

Ежегодно в стационарных отделениях больницы лечатся свыше 24 тысяч пациентов.

Кроме того, ежедневно с выездом на места автомобильным и санитарно-авиационным транспортом специалистами отделения экстренной консультативной медицинской помощи оказывается экстренная помощь при осложнённых заболеваниях, травмах, при необходимости производятся оперативные вмешательства.

Из 404 врачей, работающих в больнице, 4 имеют учёную степень доктора медицинских наук, 33 являются кандидатами медицинских наук, высшая квалификационная категория у 159 врачей. Из 719 средних медицинских работников — у 249 высшая квалификационная категории, 26 медицинских сестёр имеют высшее сестринское образование. 7 врачей нашей больницы носят почётное звание «Заслуженный врач Российской Федерации», 6 – почётное звание «Заслуженный работник здравоохранения Российской Федерации». Нагрудным знаком «Отличник здравоохранения» награждены 31 врач и 6 средних медицинских работников. Почётную грамоту Министерства здравоохранения Российской Федерации имеют 32, почётную грамоту Министерства здравоохранения Оренбургской области – 94 работника больницы.

Совместная работа областной клинической больницы и Оренбургского государственного медицинского университета (института, академии) по подготовке медицинских кадров высшего звена имеет более чем 70-летнюю историю. В настоящее время на нашей базе работают пять кафедр ГБОУ ВПО «Оренбургский государственный медицинский университет».

Для подготовки кадров среднего звена на базе учреждения функционируют вечернее отделение и отделение последипломной подготовки специалистов со средним медицинским и фармацевтическим образованием областного медицинского колледжа.

Наше учреждение имеет лицензию на все осуществляемые виды медицинской деятельности, в том числе на работы и услуги при оказании высокотехнологичной медицинской помощи по 14 специальностям.

Мы надеемся, что наш сайт не только поможет вам найти необходимую информацию, но и оставит у вас самые приятные впечатления.

Главный  врач

ГАУЗ «Оренбургская областная клиническая больница»

 

 

 

 

 

А. В. Редюков

Лекция от Анатолия Власенко «Доказательная оториноларингология».

Уникальные интерактивные лекции по доказательной отоларингологии для специалистов и родителей прошли 19 ноября в Учебном Центре БЭБИБУМ

Когда-то мы выбрали сложный путь доказательной медицины, и стараемся активно развиваться в этом направлении. Бэбибум — единственная клиника в области, которая налаживает контакты с коллегами по доказательной медицине из других стран, поэтому мы приглашаем лучших спикеров — чтобы развеивать мифы и доносить до наших пациентов информацию из проверенных источников. Мы всегда будем учиться, перенимать опыт и, непременно, делиться своим — чтобы выполнять свою главную миссию — заботиться о ВАС и ВАШИХ ДЕТЯХ! 

 19 ноября прошла в стенах Учебного Центра БЭБИБУМ прошли сразу 2 лекции от известного оториноларинголога и сурдолога Украины, Члена Европейской и Украинской академии педиатрии, Анатолия Власенко. 

Во время трехчасового интенсива со специалистами было разобрано множество злободневных тем: 

1. Современная классификация ЛОР-заболеваний и формулировка диагнозов, кодирование МКБ-10 
2. Рациональная а/б-терапия при ЛОР-заболеваниях. Насколько актуален Бисептол?
3. Алгоритмы принятия решений о назначении а/б-терапии при вирусных ЛОР-заболеваниях (риносинусит, отит)
4. Сложные капли — вред или польза?
5. Антигистаминные препараты при ЛОР-заболеваниях
6. Аллергический ринит — как провести дифдиагноз?
7. Вакцинация при ЛОР-заболеваниях
8. Тонзилор — вред или польза?
9. Аденоиды — как отобразить их патологию в диагнозе, тактика ведения (консервативное, хирургическое) 
10. Аденоиды — криотерапия, лазерное лечение — вред или польза?
11. Муколитики при ЛОР-патологии.

С мамами обсуждали:
1. Зачем нужен лор-врач. При каких симптомах достаточно консультации педиатра, при каких необходимо обращаться к Лору.
2. Надо ли лечить сопли. Как долго они могут сохраняться
3. Противовирусные препараты, капли в нос. Вред, польза, эффективность.
4. Аденоиды. Удалять или нет. Совместное лечение со стоматологом и ортодонтом
5. Эффективность крио, лазера, тонзилор
6. Отит. Самолечение. Последствия запущенного отита

Информации было много: какие-то факты были довольно неожиданными, какие-то давно известными, но все были логичными и доказанными. Как врачи, так и родители были в восторге от самого интенсива и от количества приобретенных знаний. 

Говорят, что хотят больше таких полезных спикеров. А мы что? А мы, конечно же, будем стараться их приглашать.

Тест с ответами «Аденоидит: диагностика и лечение»

Проверь свои знания в тесте «Аденоидит: диагностика и лечение».

1. «Другие хронические болезни миндалин и аденоидов» по МКБ-10 кодируются

1) J03.9
2) J06.9
3) J35.2
4) J35.8

2. «Острая инфекция верхних дыхательных путей неуточненная» по МКБ-10 кодируется

1) J03.9
2) J06.9 
3) J36

3. «Острый фарингит неуточненный» по МКБ-10 кодируется

1) J02.9 
2) J34.2
3) J35.0
4) J35.2
5) J36

4. «Слепым способом» считается выполнение аденотомии

1) в условиях местной анестезии или комбинированной (системные обезболивающие + седативные препараты) 
2) сочетано с деструкцией трубных валиков
3) тонзиллотомом Матье

5. Аденоидит — это

1) воспаление глоточной миндалины 
2) воспаление небной миндалины
3) воспаление язычной миндалины

6. Аденоидит может протекать как

1) латентный
2) острый 
3) подострый
4) хронический

7. Аденоиды — это

1) выбухание задней стенки глотки
2) выбухание надгортанника
3) глоточная (носоглоточная) миндалина 
4) лимфоидная ткань между передней и задней небными дужками
5) рудимент мягкого неба

8. Аденоиды в норме образованы скоплением лимфоидной ткани в полости

1) гортани
2) носа
3) носоглотки

9. Аденотомия может выполняться в следующих условиях

1) латерализации
2) масочного наркоза
3) медиализации
4) местной анестезии или комбинированной (системные обезболивающие + седативные препараты)

10. Аспирация срезанной аденоидной ткани может произойти во время

1) аденотомии в условиях местной анестезии 
2) аденотомии в условиях эндотрахеального наркоза
3) тонзиллэктомии в условиях эндотрахеального наркоза

11. В создании регионарного иммунитета большое значение придается способности миндалин

1) гипертрофироваться
2) отекать
3) покрываться наложениями
4) продуцировать и секретировать в просвет глотки различные биологически активные вещества и клеточные элементы

12. В фармакотерапии аденоидита используют:

1) антисептики 
2) бактериальные лизаты 
3) глицинсодержащие препараты
4) топические и системные антибиотики

13. Венозная сеть глоточной миндалины непосредственно связана с

1) внутричерепными и позвоночными венами 
2) нижней полой
3) портальной веной
4) угловой веной

14. Выберите верное утверждение, связанное с возрастным развитием глоточной миндалины

1) у детей до 15 лет в норме глоточная миндалина не меньше третей степени
2) у детей после 15 лет в норме глоточная миндалина не меньше второй степени
3) у новорожденных глоточная миндалина контурируется в виде 2-6 тонких сагиттальных складок, которые при рождении быстро утолщаются, приобретают вид валиков, между которыми хорошо прослеживаются борозды 
4) у новорожденных глоточная миндалина контурируется в виде шарообразного образования 10 х 40 см

15. Диагностика аденоидита включает:

1) жалобы 
2) радионуклидное исследование аденоидной ткани
3) сбор анамнеза 
4) стандартный оториноларингологический осмотр

16. Из каких отделов состоит глотка?

1) гортаноглотка 
2) носоглотка 
3) ротоглотка 
4) языкоглотка

17. Инволюция аденоидов обычно происходит с

1) 16-17 лет
2) 2-3х лет
3) 20-25 лет
4) 8-9 лет

18. Инструмент для удаления аденоидов называется по автору

1) аденоскоп Риттера
2) аденотом Бекмана 
3) аденотом Макджейсона
4) тонзиллотом Матье

19. К способам эндоскопической аденотомии можно отнести

1) ороэпифарингеальный доступ 
2) транскутанный доступ
3) эдоуральный доступ

20. К этиологическим факторам аденоидита относятся:

1) аллергия 
2) отомикоз
3) плохая аэрация носоглотки 
4) частые эпизоды ОРВИ

21. Клиника аденоидита включает

1) постоянное головокружение
2) эпизоды дисфонии, являющийся проявлением ларингомаляции
3) эпизоды продуктивного кашля (особенно ночью и утром), являющиеся проявлением постназального синдрома

22. Клиника аденоидита включает:

1) амнезию
2) возможное развитие острого или экссудативного среднего отита 
3) нейросенсорную тугоухость
4) частые эпизоды простудных заболеваний (особенно в холодное время года) 
5) эпизоды продуктивного кашля (особенно ночью и утром), являющиеся проявлением постназального синдрома (стекания слизи по задней стенки глотки)

23. Консервативное лечение аденоидита включает следующее:

1) аденотомию
2) назначение мукорегулирующих препаратов 
3) противовоспалительную терапию 
4) тонзиллэктомию

24. Консервативное лечение аденоидита включает следующее:

1) иммунопробинг
2) назначение антимикробных препаратов 
3) назначение пробиотиков 
4) физические методы лечения (физиотерапия) и рефлексотерапия

25. Лечение аденоидита включает:

1) консервативную терапию 
2) хирургическое лечение — аденотомию 
3) хирургическое лечение — конхотомию
4) хирургическое лечение — тонзиллэктомию

26. Лимфоаденоидная ткань в носоглотке представлена

1) глоточной миндалиной 
2) пейеровыми бляшками
3) узлом Розенмюллера

27. Лимфоидно-глоточное кольцо (Вальдейера-Пирогова) включает миндалины:

1) глоточная 
2) сошниковая
3) сфеноидальная
4) трубные

28. Лимфоидно-глоточное кольцо (Вальдейера-Пирогова) включает следующие миндалины:

1) небные 
2) сошниковая
3) хоанальные
4) язычная

29. Методом инструментальной диагностики аденоидита является

1) КТ носоглотки
2) МРТ носоглотки
3) УЗИ щитовидной железы
4) эндоскопическое исследование полости носа и носоглотки

30. Миндалины — орган местного иммунитета лимфоидного аппарата глотки, где происходит активная выработка

1) IgA 
2) адреналина
3) инсулина

31. Основные задачи хирургии носоглотки:

1) восстановление носового дыхания 
2) восстановление проходимости слуховых труб 
3) создание небно-глоточного клапана
4) элиминация очага хронической инфекции в носоглотке

32. Острый аденоидит- это

1) непроходимость наружного слухового прохода
2) острое воспаление глоточной миндалины преимущественно инфекционной этиологии, ассоциированное с острым воспалением ротоглотки или слизистой полости носа, длительность течения которого обычно не превышает 1 месяца 
3) острый асептический процесс в хоанах

33. Острый и хронический аденоидит

1) имеют код по МКБ-10 — J32.5
2) имеют код по МКБ-10 — J35.0
3) имеют код по МКБ-10 — J35.2
4) не выделены в отдельную нозологическую форму

34. Острым аденоидитом можно считать клинические проявления воспаления глоточной миндалины, длительностью

1) более 1 года
2) не более 1 месяца 
3) от 10 месяцев

35. Парной миндалиной является

1) вторичная
2) глоточная
3) трубная 
4) язычная

36. Перечислите особенности строения глотки у детей

1) аденоидные вегетации 
2) малые размеры 
3) отсутствие небных миндалин
4) отсутствие язычной миндалины
5) уплощенная форма

37. По преобладающему этиологическому компоненту аденоидит может быть:

1) аллергический 
2) бактериальный 
3) бактериофагальный
4) вирусный 
5) грибковый

38. По типу воспалительной реакции можно выделить:

1) гнойную форму аденоидита 
2) отёчно-катаральную форму аденоидита 
3) полипозно-складчатую форму аденоидита

39. При проведении аденотомии под зеркально-микроскопическим контролем позиция хирурга

1) билатеральная
2) краниальная 
3) монополярная

40. Регионарными лимфатическими узлами для глоточной миндалины являются:

1) паховые
2) передние шейные 
3) подмышечные
4) поднижнечелюстные

41. Системная антибактериальная терапия аденоидитов у детей может включать

1) аминогликозиды
2) защищенные аминопенициллины 
3) фторхинолоны

42. Сколько трубных миндалин присутствует в носоглотке?

1) 1 миндалина
2) 2 миндалины 
3) 3 миндалины
4) 4 миндалины

43. Трансназальный доступ при аденотомии характеризуется следующим:

1) не всегда позволяет оперировать прицельно область глоточного устья слуховой трубы, структуры в хоане
2) невозможностью выполнения хирургических вмешательств при деформациях в полости носа, у детей раннего возраста, рубцово-спаечный процесс в полости носа
3) неудобство для хирурга правши

44. У детей заглоточное пространство

1) имеет большое количество лимфатических узлов 
2) крупнее, чем у взрослых
3) отсутствует

45. Хронический аденоидит — это

1) ликворея, периодически возникающая в течение 1 года жизни ребенка
2) хронический асептический процесс в хоанах
3) хроническое полиэтиологичное заболевание, в основе которого лежит нарушение физиологических иммунных процессов глоточной миндалины

46. Что является особенностью глоточной миндалины у детей?

1) инволюция глоточной миндалины обычно происходит с 8-9 лет
2) у детей любого возраста глоточная миндалина не меньше 2 степени
3) у детей любого возраста глоточная миндалина не меньше 3 степени

47. Этиологические факторы аденоидита:

1) ВИЧ-инфекция
2) нейросенсорная тугоухость
3) плохая аэрация носоглотки 
4) хроническая Эпштейн-Барр вирусная инфекция

причины, симптомы, диагностика и лечение

Аденоиды – патологическое разрастание лимфоидной ткани носоглоточной миндалины, чаще у детей 3-10 лет. Сопровождается затруднением свободного носового дыхания, храпом во время сна, гнусавостью голоса, насморками. Ведет к частым простудным заболеваниям и воспалению в среднем ухе, снижению слуха, изменению голоса, невнятной речи, задержке развития, формированию неправильного прикуса. Диагноз выставляется отоларингологом на основании данных фарингоскопии, риноскопии, рентгенографии носоглотки, эндоскопического исследования носоглотки. При хирургическом удалении аденоидов (аденотомии, криодеструкции) не исключен рецидив их разрастания.

Общие сведения

Аденоиды – патологическое увеличение носоглоточной миндалины. Заболевание выявляется у 5-8% детей в возрасте от 3 до 7 лет, одинаково часто поражает мальчиков и девочек. У детей старшего возраста частота заболеваемости уменьшается. У пациентов в возрасте старше 15 лет гипертрофия носоглоточной миндалины выявляется редко, хотя в отдельных случаях болеть могут и взрослые.

Вместе и пищей, водой и воздухом в организм человека через рот проникает огромное количество микробов. В глотке находятся лимфоидные образования (миндалины), которые препятствуют проникновению инфекции и защищают организм от болезнетворных микроорганизмов. Миндалины образуют глоточное кольцо (кольцо Вальдейра-Пирогова). Носоглоточная миндалина входит в состав глоточного кольца и располагается на своде носоглотки. Миндалина хорошо развита у детей, с возрастом уменьшается и часто полностью атрофируется.

Аденоиды

Причины

Существует наследственная предрасположенность к разрастанию носоглоточной миндалины, обусловленная отклонением в строении эндокринной и лимфатической системы (лимфатико-гипопластический диатез). У детей с данной аномалией наряду с аденоидами нередко выявляется снижение функции щитовидной железы, которое проявляется апатичностью, вялостью, отечностью и склонностью к полноте.

Предрасполагающим фактором в развитии аденоидов может быть нарушение питания (перекармливание) и токсическое влияние ряда вирусов. Вторичное воспаление и увеличение аденоидов может развиться после таких детских инфекционных заболеваний, как коклюш, корь, скарлатина и дифтерия.

Классификация

Выделяют три степени увеличения аденоидов:

  • 1 степень – аденоиды закрывают треть хоан и сошника. В течение дня ребенок дышит свободно. Ночью, из-за перехода в горизонтальное положение и увеличение объема аденоидов дыхание затруднено.
  • 2 степень – аденоиды закрывают половину хоан и сошника. Ребенок и днем и ночью дышит преимущественно ртом, часто храпит во сне.
  • 3 степень – аденоиды целиком (или почти целиком) закрывают сошник и хоаны. Симптомы те же, что и при 2 степени, но выражены более резко.

Симптомы аденоидов

Нос ребенка постоянно или периодически заложен, характерно обильное серозное отделяемое. Ребенок спит с открытым ртом. Из-за затруднений с дыханием сон больного становится беспокойным, сопровождается громким храпом. Детям часто снятся кошмары. Во время сна возможны приступы удушья, обусловленные западением корня языка.

При аденоидах большого размера нарушается фонация, голос пациента становится гнусавым. Отверстия слуховых труб закрываются разросшимися аденоидами, что обуславливает снижение слуха. Дети становятся рассеянными и невнимательными. Из-за аденоидов развивается застойная гиперемия окружающих мягких тканей (задних небных дужек, мягкого неба, слизистой оболочке носовых раковин). В результате проблемы с дыханием усугубляются, часто развиваются риниты, со временем переходящие в хронический катаральный ринит.

Разрастание аденоидной ткани нередко осложняется аденоидитом (воспалением аденоидов). При обострении аденоидита появляются признаки общей неспецифической инфекции (слабость, повышение температуры). Аденоиды и особенно аденоидит часто сопровождаются увеличением регионарных лимфатических узлов. Длительное течение болезни приводит к нарушению нормального процесса развития лицевого скелета. Нижняя челюсть становится узкой, удлиняется. Из-за нарушения формирования твердого нёба, возникают нарушения прикуса. Лицо пациента приобретает своеобразный «аденоидный вид».

Осложнения

Аденоиды могут влиять на механизм дыхания. При прохождении струи воздуха через носовую полость происходит рефлекторное формирование характера вдоха и выдоха. Поэтому человек всегда дышит через нос глубже, чем через рот. Длительное дыхание через рот обуславливает незначительную, но некомпенсированную недостачу вентиляции легких.

Кровь ребенка хуже насыщается кислородом, возникает хроническая нерезко выраженная гипоксия мозга. Из-за хронического нарушения оксигенации у детей с длительным течением аденоидов иногда развивается некоторая умственная отсталость. Пациенты часто жалуются на головные боли, плохо учатся, испытывают трудности с запоминанием учебного материала.

Уменьшение глубины вдоха в течение длительного периода времени становится причиной нарушения процесса формирования грудной клетки. У ребенка развивается такая деформация грудной клетки как «куриная грудь». У ряда пациентов с аденоидами выявляется малокровие, нарушение деятельности желудочно-кишечного тракта (ухудшение аппетита, рвота, запор или понос).

Диагностика

Диагноз выставляется на основании подробного осмотра, тщательно собранного анамнеза и данных инструментальных исследований. Используются следующие инструментальные методики:

  • Фарингоскопия. В ходе исследования проводится оценка состояния ротоглотки и небных миндалин. Определяется наличие отделяемого слизисто-гнойного характера на задней стенке глотки. Для осмотра аденоидов мягкое нёбо поднимают шпателем.
  • Передняя риноскопия. Врач осматривает носовые ходы. Исследование позволяет выявить отек и наличие отделяемого в носовой полости. В нос ребенка закапывают сосудосуживающие капли, после чего становятся видны закрывающие хоаны аденоиды. Ребенка просят сглотнуть. Возникающее сокращение мягкого неба вызывает колебание аденоидов, при котором видны световые блики на поверхности миндалин.
  • Задняя риноскопия. Врач осматривает носовые ходы через ротоглотку при помощи зеркала. При осмотре видны аденоиды, которые представляют собой полушаровидную опухоль с бороздами на поверхности или группу свисающих образований в различных отделах носоглотки. Исследование отличается высокой информативностью, однако его проведение представляет определенные затруднения, особенно – у детей младшего возраста.
  • Рентгенография носоглотки. Рентгенограмма выполняется в боковой проекции. При проведении исследования ребенок открывает рот, чтобы аденоиды более четко контрастировались воздухом. Рентгенограмма позволяет надежно диагностировать аденоиды и точно определить их степень.
  • Эндоскопия носоглотки. Высокоинформативное исследование, позволяющее произвести детальный осмотр носоглотки. При осмотре детей младшего возраста требуется анестезия.

Лечение аденоидов

Тактика лечения определяется не столько размером аденоидов, сколько сопутствующими расстройствами. Показания к операции определяет отоларинголог. У маленьких детей операции при аденоидах проводятся под общей анестезией. У детей старшего возраста они часто выполняются под местным обезболиванием. Возможно проведение криодеструкции аденоидов или их эндоскопическое удаление.

У склонных к аллергии пациентов аденоиды часто рецидивируют, поэтому оперативное лечение следует комбинировать с десенсибилизирующей терапией. При разрастании носоглоточных миндалин 1 степени и слабо выраженном нарушении дыхания рекомендуется консервативная терапия (закапывание 2% раствора протаргола). Пациенту назначают общеукрепляющие средства (витамины, препараты кальция, рыбий жир).

Лечение аденоидов у детей и взрослых в Геленджике: адреса, цены, отзывы. Запись на лечение аденоидита

Была первый раз в вашей клинике у врача Боброва Е.Е. В восторге от такого приема! Внимательный, грамотный, хочет докопаться до сути и помощь пациенту на все 100% Цените таких специалистов !!! Браво !!! С большим уважением, Ольга Васильевна

Ольга Васильевна, 01.02.2021

Спасибо большое Евгению Евгеньевичу. Замечательный врач. Приехали на отдых, сильно разболелись уши. Попала к нему на приём, он помог, выписывал все по назначению. Уши очень быстро прошли. Если буду там на отдыхе и что то случится, только к нему буду обращаться!!!!!

Евгения, 11.01.2021

Евгений Евгеньевич очень грамотный и внимательный доктор. Была у него, когда принимал в Иркутске, в обычной поликлинике. Обратилась с болью в ухе. Евгений Евгеньевич всё проверил, с ухом проблем не было. Оказалось, что слишком зажаты мышцы плеч и шеи (он прверил), которые пережимали нерв, окружающий ухо. Потом дал рекомендации, как лечить хронический тонзилит после рождения ребенка (на момент приема я была беременна), объяснил все риски, написал чем лечить. Очень довольна его работой. Жаль, что такие специалисты уезжают из нашего города.

Анна, 08.08.2020

Побывали на приеме у детского лор-врача. Очень хороший, компетентный, добрый человек и врач замечательный Бобров Евгений Евгеньевич, спасибо огромное.

Пациент, 27.07.2020

Очень компетентный и вежливый врач. Рада, что попала к нему.

Юлия, 16.07.2020

Была на приёме у Евгения Евгениевича, врач из категории от бога. Вот это я понимаю специалист, при чём с Большой буквы. Осмотрел 3 минуты проблема устранена. Молодец, буду рекомендовать всем знакомым!!!!!!!!!???

Зинаида , 04.07.2020

Мне понравилось, чисто, уютно, комфортно. Была на приеме у Боброва Е.Е. очень тактичен, аккуратен, все объяснил, разложил по полочкам. В общем мне понравилось, если будут проблемы с ЛОР органами, то приду только к нему!

Вера, 20.02.2020

Хочу выразить искреннюю благодарность Евгению Евгеньевичу Боброву. Замечательный доктор и добрый человек. Евгений Евгеньевич, Вы лечите не только процедурами, но и добрым словом! Успехов Вам и здоровья!

Пациент, 03.02.2020

Хороший врач молодой,но опытный обратились недавно к нему с мужем у мужа был гайморит .Относится очень доброжелательно и главное профессионально спасибо ему .

Дарья, 26.01.2020

Была на приеме у лор-врача 16.12.2019г. Очень внимательный доктор, с профессиональным подходом, выслушал меня, поставил правильный диагноз,оказал своевременную помощь. Не ограничивается назначением лечения,объясняет причину болезни, рассматривает проблему со всех сторон. Ни одного лишнего лекарства, четкое лечение, тщательный осмотр. Рекомендую. Если лор, то только Бобров Евгений Евгеньевич! Спасибо Вам огромное!

Любовь, 18.12.2019

Отдыхал в Кабардинке, продуло ухо, решил обратится к врачу, нашёл через интернет и совсем не пожалел, доктор очень внимательный, осмотрел от и до, все выслушал, чётко сказал и написал инструкцию что делать! Спасибо доктор!

Левон, 29.08.2019

Прошу премировать врача-отоларинголога Боброва Евгения Евгеньевича. Обратилась впервые, буду обращаться по необходимости только к нему. Самый грамотный врач-отоларинголог в моей жизни. Спасибо большое!

А.Ю., 21.08.2019

Выражаю глубокую благодарность доктору Боброву Евгению Евгеньевичу за его доброту, приятное общение, качественное лечение. Желаю ему самому здоровья, удовлетворения от работы и счастья. Побольше бы таких докторов!!!

Пациент, 01.08.2019

Хочу выразить огромную благодарность замечательному специалисту с Большой буквы Боброву Евгению Евгеньевичу. Внимательное и осторожное обращение с больным ребенком. Побольше бы таких врачей. Просим поощрить премией.

Пациент, 30.07.2019

Пришла впервые по отзывам в вашу клинику. Меня осматривал лор-врач Бобров Евгений Евгеньевич, очень внимательный, потратил на меня больше часа, назначил лечение, которое помогло в короткое время. Кроме того обнаружил двусторонний гайморит без снимка, что позже подтвердилось в рентген кабинете. Очень благодарна. Теперь только в вашу клинику буду ходить!

Пациент, 29.04.2019

Большое спасибо за вылеченное правое ухо. Не самое приятное чувство, когда ухо болит — всё настроение сразу портится, но благодаря назначенному лечению за пару дней ухо вылечилось. Еще раз большое спасибо!!!

Андрей, 29.04.2019

«СберЗдоровье» запустил бесплатный сервис для определения возможной болезни по симптомам с помощью ИИ Статьи редакции

Сервис с точностью 75-91% предложит диагнозы и порекомендует врача.

  • «СберЗдоровье» (ранее DocDoc), «СберМед ИИ» и лаборатория ИИ «Сбера» запустили бесплатный онлайн-сервис, который поможет определить, к какому врачу следует обратиться при недомогании. Об этом vc.ru сообщил представитель компании.
  • Сервис помогает узнать три возможных диагноза и к какому врачу лучше обратиться. Для этого пользователь должен описать как минимум три симптома в специальном поле, а математическая модель проанализирует введённые данные. Симптомы можно описать своими словами — система понимает сокращения и текст с ошибками.
  • После постановки диагноза система предлагает записаться на приём к врачу или проконсультироваться удалённо через «СберЗдоровье». Чтобы воспользоваться сервисом, не нужно регистрироваться или вводить личные данные.
  • Чтобы обучить нейросеть, в неё загрузили более 4 млн установленных обезличенных диагнозов и их симптомов, рассказали в «СберЗдоровье». В памяти сервиса более 265 вероятных болезней — это 95% диагнозов россиян при первичных обращениях в больницы или поликлиники. Точность постановки диагноза в компании оценили в диапазоне от 75% до 91%.
  • В будущем компания планирует обучить нейросеть определять Covid-19 даже по редким симптомам: при характерных для коронавируса симптомах сервис предупредит о подозрении на болезнь и предложит обратиться в клинику, сдать ПЦР-тест или вызвать скорую.

18 005 просмотров

{ «author_name»: «Лиана Липанова», «author_type»: «editor», «tags»: [«\u0441\u0431\u0435\u0440″,»\u043d\u043e\u0432\u043e\u0441\u0442\u044c»,»\u043d\u043e\u0432\u043e\u0441\u0442\u0438″,»\u0437\u0434\u043e\u0440\u043e\u0432\u044c\u0435″], «comments»: 166, «likes»: 42, «favorites»: 65, «is_advertisement»: false, «subsite_label»: «services», «id»: 183124, «is_wide»: true, «is_ugc»: false, «date»: «Wed, 02 Dec 2020 13:02:04 +0300», «is_special»: false }

{«id»:373364,»url»:»https:\/\/vc.ru\/u\/373364-liana-lipanova»,»name»:»\u041b\u0438\u0430\u043d\u0430 \u041b\u0438\u043f\u0430\u043d\u043e\u0432\u0430″,»avatar»:»0bfc4a78-cd85-67dc-167e-b4834ca1c5cd»,»karma»:38760,»description»:»»,»isMe»:false,»isPlus»:true,»isVerified»:false,»isSubscribed»:false,»isNotificationsEnabled»:false,»isShowMessengerButton»:false}

{«url»:»https:\/\/booster.osnova.io\/a\/relevant?site=vc»,»place»:»entry»,»site»:»vc»,»settings»:{«modes»:{«externalLink»:{«buttonLabels»:[«\u0423\u0437\u043d\u0430\u0442\u044c»,»\u0427\u0438\u0442\u0430\u0442\u044c»,»\u041d\u0430\u0447\u0430\u0442\u044c»,»\u0417\u0430\u043a\u0430\u0437\u0430\u0442\u044c»,»\u041a\u0443\u043f\u0438\u0442\u044c»,»\u041f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0438\u0442\u044c»,»\u0421\u043a\u0430\u0447\u0430\u0442\u044c»,»\u041f\u0435\u0440\u0435\u0439\u0442\u0438″]}},»deviceList»:{«desktop»:»\u0414\u0435\u0441\u043a\u0442\u043e\u043f»,»smartphone»:»\u0421\u043c\u0430\u0440\u0442\u0444\u043e\u043d\u044b»,»tablet»:»\u041f\u043b\u0430\u043d\u0448\u0435\u0442\u044b»}},»isModerator»:false}

Скрининг бластомеров у рыбок данио определяет подавление ретиноевой кислотой MYB при аденоидно-кистозной карциноме | Журнал экспериментальной медицины

Плюрипотентные клетки были использованы для исследования путей развития, которые участвуют в генетических заболеваниях и онкогенных событиях. Чтобы найти новые методы лечения, которые будут нацелены на опухоли, управляемые MYB , мы разработали плюрипотентную систему культивирования бластомеров рыбок данио. Мы провели химико-генетический скрининг и идентифицировали агонисты ретиноевой кислоты как супрессоры экспрессии c-myb .Обработка ретиноевой кислотой также снизила экспрессию гена c-myb в клетках лейкемии человека. Транслокации, вызывающие сверхэкспрессию онкогенного фактора транскрипции MYB , являются молекулярными признаками аденоидно-кистозной карциномы (АЦК), злокачественной опухоли слюнной железы, не требующей эффективного лечения. Агонисты ретиноевой кислоты ингибировали рост опухоли in vivo на моделях ксенотрансплантатов, полученных от пациентов с ACC, и снижали связывание MYB с транслоцированными энхансерами, тем самым потенциально уменьшая петлю положительной обратной связи MYB, управляющую ACC.Наши результаты подтверждают, что плюрипотентная система культивирования клеток рыбок данио является методом выявления модуляторов образования опухолей, в частности, ретиноевой кислотой в качестве потенциального нового эффективного средства для лечения АЦК.

Плюрипотентные клетки могут быть направлены на дифференциацию in vitro для моделирования заболеваний, исследований туморогенеза и скрининга лекарств (Cohen and Melton, 2011). Однако протоколы направленной дифференциации могут быть длительными и трудоемкими и, следовательно, не поддаются высокопроизводительному скринингу.Химический скрининг на основе изображений с использованием культивированных плюрипотентных клеток бластомеров рыбок данио устанавливает систему, которая может использоваться с высокой пропускной способностью и использует преимущества методов химической генетики с рыбками данио. Здесь мы использовали эту систему культивирования эмбрионов рыбок данио для скрининга модуляторов c-myb: GFP– экспрессирующих популяций клеток, поддерживаемых в гетерогенных культурах. Идентификация химических супрессоров может обеспечить новые методы лечения опухолей, управляемых MYB , тем самым демонстрируя преимущества этой плюрипотентной культуры клеток эмбрионов рыбок данио для понимания и использования онкогенных регуляторных сетей и для анализа образования опухолей в различных экспериментальных условиях.

Аденоидно-кистозная карцинома (АКК) — это злокачественное новообразование, возникающее из секреторных желез, обычно слюнных желез в голове и шее, и характеризуется медленным и непредсказуемым ростом, который часто приводит к летальному исходу (Coca-Pelaz et al., 2015). ACC имеет склонность распространяться по нервным волокнам и метастазировать в другие части тела. Повторяющиеся транслокации MYB были идентифицированы в большинстве ACC, которые характеризуются сверхэкспрессией мишеней MYB и MYB (Persson et al., 2009; Ho et al., 2013; Mitani et al., 2016). MYB — это главный фактор транскрипции, играющий роль в пролиферации и дифференцировке (Oh and Reddy, 1999), и многие из транслокаций ACC вовлекают другой фактор транскрипции, NFIB (Ho et al., 2013). Изменения в MYB были вовлечены в различные виды рака, включая лейкоз, педиатрические глиомы и рак толстой кишки, груди и простаты (Ramsay and Gonda, 2008). Недавно было показано, что ACC-специфические транслокации MYB способствуют трансформации в генно-инженерных моделях мышей (Mikse et al., 2016).

Несмотря на агрессивное комплексное лечение, примерно у половины пациентов с ОКС развиваются отдаленные метастазы, и до одной трети умирают в течение двух лет после постановки диагноза (Conley and Dingman, 1974; Spiro, 1997; Bradley, 2004; Bobbio et al., 2008). Не существует стандартного режима системной химиотерапии или одобренной лекарственной терапии для рецидивирующих или метастатических ОХК, и ни одна лекарственная терапия не продемонстрировала преимущества ни выживаемости, ни выживаемости без прогрессирования заболевания.Полное секвенирование экзома опухолей ACC выявило мутации в генах NOTCH и передачи сигналов фактора роста фибробластов и ремоделирования хроматина, которые могут служить потенциальными терапевтическими мишенями (Hickman et al., 1984; Stephens et al., 2013; Ross et al., 2014) . Однако с 1985 года более 30 клинических испытаний фазы II, включающих цитотоксическую терапию или таргетную терапию против c-Kit, рецептора эпидермального фактора роста, рецептора фактора роста фибробластов и мишени рапамицина у млекопитающих, среди прочего, не увенчались успехом (Yarbrough et al., 2016). Активация мутаций NOTCh2 происходит примерно в 15% ACC (Ferrarotto et al., 2017), что ограничивает терапевтическое использование ингибиторов Notch. Следовательно, нацеливание на MYB представляет собой крайне необходимую терапевтическую стратегию, которая может вызвать широкую клиническую активность во многих опухолях ACC.

Были доказательства того, что передача сигналов рецептора ретиноевой кислоты (RAR) инактивировала функцию белков MYB, и были предложены регуляторные механизмы, в том числе посредством физического ингибирующего взаимодействия (Boise et al., 1992; Смарда и др., 1995; Пфицнер и др., 1998; Земанова и Смарда, 1998; Lutz et al., 2001). Однако механистические исследования RAR-регуляции рака, вызываемого MYB , такого как ACC, в котором энхансерные области сопоставляются с локусом MYB , отсутствовали. Мы сообщаем о первом применении терапии, направленной на MYB, для пациентов с ОКС. Кроме того, мы выполнили наши механистические исследования, включая анализ последовательности иммунопреципитации хроматина (ChIP-seq), непосредственно на опухолях ACC человека, полученных от пациентов, чтобы установить нашу модель ингибирования опухоли.

Здесь, с помощью подхода к скринингу культур клеток эмбрионов трансгенных рыбок данио, мы идентифицировали агонисты ретиноевой кислоты как мощные супрессоры флуоресценции c-myb: GFP . Мы показали, что полностью транс-ретиноевая кислота (ATRA) снижает c-myb + гемопоэтических стволовых и прогениторных клеток (HSPC) в живых трансгенных эмбрионах рыбок данио и путем гибридизации in situ, но не влияет на популяции дифференцированных миелоидных клеток.Мы обработали человеческие клетки U937 различными агонистами ретиноевой кислоты и наблюдали быстрое снижение уровней c-myb , что показало, что ретиноевая кислота подавляла экспрессию c-myb посредством регуляции транскрипции. Мы были заинтересованы в применении агонистов ретиноевой кислоты к моделям ACC. ATRA и изотретиноин замедляли рост опухоли в моделях примаграфта ACC in vivo и уменьшали количество транслоцированных энхансеров, связанных с MYB. Мы наблюдали физическое связывание RAR в локусе MYB , что согласуется с нашей моделью индуцированного ретиноевой кислотой подавления транскрипции MYB .Таким образом, наша работа устанавливает доклиническую активность ATRA и других агонистов ретиноевой кислоты в ACC и вскоре приведет к клиническим испытаниям.

Чтобы изучить роль ретиноевой кислоты в эндогенной экспрессии c-myb , мы отсортировали экспрессирующих c-myb: GFP клеток из 72-hpf трансгенных эмбрионов и обработали их ex vivo 1 мкМ агонистами ретиноевой кислоты в течение 6 часов ( Рис. 2 А). На этой стадии трансгенные рыбки данио экспрессируют c-myb: GFP в крови, нервной системе, вылупляемых железах и тканях глаза.Обработка ретиноевой кислотой вызвала быстрое снижение экспрессии транскриптов c-myb и GFP , тогда как экспрессия гена mpx не пострадала (рис. 2B), в соответствии с нашими результатами in vivo.

Мы предсказали, что подавление ретиноевой кислоты экспрессии c-myb в эмбрионах рыбок данио и клеточных культурах может аналогичным образом действовать в тканях млекопитающих. Ретиноевая кислота связана с блоком дифференцировки в определенных системах, и это коррелирует со снижением уровня c-myb (Thiele et al., 1988; Вестон, 1990; Томпсон и Рамзи, 1995). Наши данные о том, что ретиноевая кислота очень быстро снижает экспрессию мРНК c-myb в изолированных клетках рыбок данио, убедительно свидетельствуют о прямом и быстром действии ретиноевой кислоты на ген myb .

Затем мы попытались обработать линии клеток человека ретиноевой кислотой и оценить экспрессию myb . В идеале, мы должны напрямую оценить, подавляет ли ретиноевая кислота myb в ACC.Не существует проверенных клеточных линий ACC, доступных для анализа in vitro, и поэтому эти эксперименты невозможны. Обсуждение с Фондом исследований аденоидной кистозной карциномы подтвердило, что доступных линий клеток АСС нет (неопубликованные данные). Хотя некоторые первичные опухоли ACC были культивированы в краткосрочной перспективе (Almeida et al., 2017; Nör et al., 2017; Panaccione et al., 2017), эти культивируемые клетки ACC плохо растут. Поэтому мы попробовали обработку ретиноевой кислотой клеток U937 человека, линии миелоидной лейкемии, которая экспрессирует высокие уровни c-myb , чтобы облегчить наши исследования in vitro.Эти исследования должны были просто доказать, что подавление myb может осуществляться в клетках человека.

Клетки

U937 подавляли экспрессию c-myb в течение 1 часа после обработки ATRA и в течение продолжительных периодов времени (рис. S3, A и B), что предполагает прямой механизм регуляции транскрипции и согласуется с предыдущими сообщениями (Smarda и др., 1995). Мы также проанализировали другие агонисты ретиноевой кислоты, которые смогли снизить экспрессию c-myb (рис.S3 C). Ретиноевая кислота связывает RAR (α, β или γ), который существует в виде гетеродимера с ретиноидным X-рецептором (RXR) и действует, чтобы контролировать транскрипцию гена при связывании лиганда (Cunningham and Duester, 2015). Хотя 9-цис-ретиноевая кислота является естественным лигандом как pan-RAR, так и RXR (Allenby et al., 1993), снижение экспрессии гена c-myb , которое мы наблюдали с агонистами pan-RAR ATRA, ретиноевой кислотой p- гидроксианилид и изотретиноин (Das et al., 2014) убедительно указывают на то, что передача сигналов через RAR специфически ответственна за подавление регуляции c-myb .Мы также наблюдали увеличение количества клеток Mac1 + U937 в ответ на обработку ATRA (данные не показаны), что согласуется с сообщениями об индуцированной ATRA дифференцировке в клетках U937 (Olsson and Breitman, 1982). Агонисты ретиноевой кислоты ингибировали пролиферацию U937 дозозависимым образом после 48 часов лечения (рис. S3, D и E), предполагая, что резкое снижение c-myb и транскрипционный ответ на ретиноевую кислоту приводят к пролиферативному дефекту. .

Транслокации MYB — это почти универсальные признаки в ACC, в которых регуляторные элементы гена MYB поддерживаются в результирующих слияниях (Wysocki et al., 2016). Рецепторы ядерных гормонов, включая стероидные рецепторы, рецепторы андрогенов и RAR, связываются с общим RXR (Evans and Mangelsdorf, 2014). Связывание одного лиганда с RXR может, таким образом, блокировать ответ на другой лиганд, по существу предотвращая потенциал трансактивации или связывание ДНК специфических рецепторов. Следовательно, ATRA, как агонист ретиноевой кислоты, может напрямую блокировать транскрипцию MYB , особенно с учетом быстрого ингибирования экспрессии гена c-myb , которое мы наблюдали при лечении ретиноевой кислотой.Кроме того, ATRA также может быть привлекательным препаратом для ACC, поскольку он клинически доступен для лечения острого промиелоцитарного лейкоза. Уменьшая транскрипцию гена MYB , мы пришли к выводу, что можно изменить течение заболевания с помощью лечения ретиноевой кислотой, нарушив петли положительной обратной связи с участием MYB .

Мы оценили эффективность ATRA и изотретиноина in vivo в испытаниях ксенотрансплантации ACC (рис.3 А). Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что ксенотрансплантаты, полученные от пациентов (PDX), служат наиболее надежной доступной доклинической моделью благодаря сохранению структуры и гетерогенности опухоли и облегчению клинического прогнозирования лекарственного ответа in vivo (Ruggeri et al., 2014). Исследования PDX особенно важны в ACC, учитывая, что в настоящее время нет клеточных линий ACC, которые можно было бы культивировать. Большинство опухолей ACC имеют низкую степень злокачественности (степени 1 и 2, с «трубчатым» и «решетчатым» паттерном соответственно), обычно демонстрируют смесь обоих этих паттернов роста, и гистологически в них преобладают миоэпителиальные клетки, тогда как небольшое количество опухолей имеют преимущественно люминальные эпителиальные клетки и более агрессивны (степень 3, с> 30% «твердым» рисунком; Seethala, 2009; van Weert et al., 2015). Для долгосрочных исследований ингибирования роста опухоли мы прививали голым мышам три различных опухоли ACC человека: x6 (примагранты 2 степени) и x9 и x11 (примагранты 3 степени). Эти модели PDX были изолированы от разных пациентов, подтверждено наличие транслокаций MYB и , и было показано, что они воспроизводят родительские опухоли по гистологии и экспрессии генов (Moskaluk et al., 2011).

Рандомизированные группы мышей обрабатывали носителем, ATRA или изотретиноином, и размер опухоли измеряли с течением времени (рис.3 Б). Обработка ретиноевой кислотой значительно подавляла рост опухоли (рис. 3С). После того, как длительные исследования роста опухоли были завершены примерно через 28 дней, мы прекратили лечение ATRA и продолжили измерять размер опухоли в группах мышей, получавших ATRA, в течение длительного периода времени, чтобы контролировать сохранение опухоли после лечения (рис. S4 A). Приведены доступные данные о весе мышей из двух из трех долгосрочных исследований (рис. S4 B). Ингибирование опухоли поддерживалось в ACC x11, но не в ACC x6 и x9, что позволяет предположить, что для нацеливания на остаточные опухолевые клетки необходимо непрерывное лечение.

Мы провели исследования ксенотрансплантации с ACC x9 и x5M1 (примаграфт 2 степени), состоящие из 3-дневной обработки носителем или ATRA для изучения краткосрочных кинетических реакций. Мы обнаружили снижение экспрессии белка MYB, как определено с помощью вестерн-блоттинга в обработанных ATRA долгосрочных примаграфтах ACC x11 и краткосрочных ACC x5M1 (фиг. 3 D и фиг. S5 A). Для этих краткосрочных исследований мы были заинтересованы в изучении примаграфт x5M1 конкретно, поскольку эта линия ACC была получена из метастатического участка и обычно считается более устойчивой к лечению.Экспрессия белка RARα увеличилась в образцах, обработанных ATRA, что указывает на то, что опухоли ответили на лечение ATRA и что RARα, таким образом, служит полезным маркером для мониторинга ответа ATRA.

Мы исследовали апоптоз по каспазе-3 и пролиферацию по маркерам Ki-67 с помощью иммуногистохимии в примаграфтах ACC x6, x9 и x11 по завершении длительного лечения через 28 дней (рис. 3, E и F; и рис. . S5 B). В исследуемые нами моменты времени лечение ATRA, по-видимому, приводило к большей гибели клеток, что могло объяснить заметное ингибирование роста опухоли, которое мы наблюдали во время испытания ксенотрансплантации, но не оказало значительного влияния на пролиферацию.Когда лечение ATRA было прекращено (рис. S4 A), ингибирование опухоли ACC x11 сохранялось, предполагая, что эти опухоли не вырастали снова, несмотря на наличие пролиферативных областей с Ki-67-положительными клетками, что является явлением, о котором сообщалось в другие виды рака (Ottewell et al., 2010).

Транслокации с участием MYB были ранее описаны в ACC для переноса сильных энхансеров в непосредственной близости от локуса MYB , и эти энхансеры также связываются белком MYB, что приводит к положительной петле обратной связи, которая управляет сверхэкспрессией MYB (Drier и другие., 2016). Поскольку для научного сообщества нет доступных линий клеток ACC, мы провели картирование связывания белка MYB в примаграфтах ACC x9 с помощью ChIP-seq после 3 дней лечения. Несколько статей опубликовали результаты ChIP-seq из примаграфт, но у нас был достаточный материал для качественного чтения. Мы, в частности, наблюдали сильное снижение связывания MYB из-за обработки ATRA на двух транслоцированных энхансерах в нижележащем регионе NFIB , который слит с локусом MYB в ACC x9 (рис.4 А). Кроме того, наблюдалось сопутствующее снижение уровня h4K27ac (маркировка активных энхансеров; Rivera and Ren, 2013) на этих сайтах энхансеров. Обработка ATRA также приводила к умеренному снижению связывания MYB на промоторе MYB , что в дальнейшем ослабляло механизмы ауторегуляторной прямой связи. После обработки ATRA мы обнаружили, что RAR физически связывается в 5′-области гена MYB и с транслоцированным энхансером ниже экзона 9 NFIB . Мы подтвердили, что эти сайты имеют мотивы связывания RARα, как определено в базе данных JASPAR (Mathelier et al., 2016).

Обработка

ATRA стимулировала повышенную экспрессию RAR из-за положительной ауторегуляции рецептором, связанным с агонистом (фиг. 5 A). Таким образом, уровни RAR становятся повышенными на промоторе и энхансере MYB (En1 на фиг. 4 A). Повышенные уровни RAR на регуляторных элементах MYB являются репрессивными и вызывают снижение экспрессии MYB . Ген CEP89 , в том числе связанный с MYB, также демонстрирует этот механизм (рис.5 В). Также возможно, что повышенное связывание RAR замещает связывание MYB, и также возможны другие сложные механизмы регуляции (Pfitzner et al., 1998; McKeown et al., 2017). Наше исследование показывает, что нарушение общей схемы ядра MYB в АСС агонистами ретиноевой кислоты приводит к связыванию RAR с геном MYB и транслоцированным энхансерам, которые подавляют связывание MYB в этих регуляторных сайтах, ингибирует транскрипцию MYB , и предлагает новую потенциальную терапию, направленную на первопричину заболевания.

Мы использовали ChIP-seq для идентификации суперэнхансеров из областей хроматина с высокими уровнями h4K27ac (Hnisz et al., 2013) в опухолях примаграфта ACC и ранжировали энхансеры на основе обогащения (Таблица S2). Гены-мишени MYB были связаны с суперэнхансерами, такими как EN1, CREB3L2, ITGA6, JAG1, NUFIP1, ARID1A, CDh2, SPEN, NOTCh2 и CCND1, как наблюдалось ранее (Drier et al., 2016). Мы также обнаружили, что многочисленные суперэнхансеры были связаны с генами нервного гребня (рис.5 C), что согласуется с сообщениями, связывающими ACC с драйверами клеток нервного гребня (Yarbrough et al., 2016). Эти супер-энхансеры открывают возможности для новых целей в ACC.

Мы определили с помощью секвенирования РНК (RNA-seq), что уровни гена RARA и RARG значительно увеличились на ~ 35% в краткосрочных примаграфтах ACC x9, а уровни MYB снизились на 18% из-за лечения ATRA ( n = 3, P <0.05). Используя анализ обогащения набора генов по этим данным РНК-seq (Subramanian et al., 2005), мы обнаружили как обогащение генов-мишеней MYB (Shepard et al., 2005), так и генов клеточного цикла (O'Farrell, 2001; Bruinsma et al. al., 2012; Wang et al., 2014), как и ожидалось, положительно ассоциировались с опухолями, обработанными носителем, и отрицательно коррелировали с опухолями, обработанными ATRA (рис. 5 D). Мы также обнаружили снижение связывания белка MYB по всему геному из-за лечения ATRA (рис. 4 B). Чтобы определить специфический эффект связывания MYB из-за индукции ATRA, мы приписали пики связывания ChIP-seq генам в пределах 15 т.п.н. и создали тепловые карты вокруг этих пиков (рис.4, В – Д). Анализ набора целевых генов ретиноевой кислоты, который включает гены, которые были либо активированы, либо подавлены, показал повышенное связывание RAR с мишенями, но отсутствие корреляции между связыванием MYB в обработанных носителем и ATRA примагрантах ACC ( Рис. 4 C). Мы дополнительно проанализировали список наборов генов, индуцированных ретиноевой кислотой, чтобы определить влияние на связывание MYB. В этом анализе пиков MYB, которые мы получили с помощью ChIP-seq, связывание MYB значительно снижалось в генах, которые были связаны с MYB в опухолях, обработанных носителем, но не было обнаружено различий в связывании в пиках опухолей, обработанных ATRA, по сравнению с носителем ( Инжир.4 D). Ген MYB является примером первого, поскольку он является мишенью для ретиноевой кислоты, и связывание MYB в опухолях, обработанных носителем, сильно снижалось после лечения ATRA. Мы также проанализировали гены-мишени MYB, которые подавлялись индукцией ATRA независимо от связывания RAR, и аналогичным образом увидели, что связывание MYB значительно уменьшилось в генах, которые были связаны с MYB в опухолях, обработанных носителем, но не было обнаружено различий в связывании в пиках. опухолей, обработанных ATRA, по сравнению с носителем (рис.4 E). Хотя существует множество генов, таких как MYB , со сниженной экспрессией после лечения ATRA, эти данные в совокупности подтверждают концепцию, что лечение ATRA приводит к специфической генной программе со сниженным связыванием MYB в определенных генах-мишенях в примагрантах, полученных от пациентов.

Наши исследования также показывают, что уровни белка RARα значительно повышаются в опухолях, обработанных ATRA, с очень низкой экспрессией в опухолях, обработанных носителем.Экспрессия RARα служит маркером ответа опухоли на ATRA (фиг. 3 D). RARα устанавливает, что опухоль получила ретиноевую кислоту, но не обязательно означает, что в опухоли снижены уровни MYB . Тем не менее, это может помочь контролировать эффективность ATRA в запланированном клиническом исследовании метастатического ОЦК. Наши исследования показывают, что ATRA действует через RAR, подавляя экспрессию MYB , возможно, посредством прерывания регулирующих петель, управляемых MYB , что приводит к отмене онкогенной активности гибридного гена.Наша работа предполагает, что длительное воздействие ATRA можно использовать для лечения ОКС.

В этом исследовании мы использовали метод химического генетического скрининга рыбок данио, который выявил агонисты ретиноевой кислоты как понижающие регуляторы c-myb . Наша высокопроизводительная платформа для скрининга бластомерных клеток использует преимущества рыбок данио, включая высокую плодовитость взрослых особей для сбора тысяч эмбрионов каждую неделю для химического скрининга и высокую степень генетической консервации у млекопитающих для надежной трансляции химических попаданий.Мы смогли автоматизировать скрининг тысяч соединений за долю времени, которое потребовалось бы для анализа считывания показаний целого эмбриона, как при скрининге на основе гибридизации in situ. Скрининг рыбок данио проводили с использованием репортера GFP, управляемого естественными регуляторными элементами транскрипции, который выявил супрессоры транскрипции c-myb . Обработка ретиноевой кислотой в ACC primagrafts приводит к более низкой занятости MYB на 5 ‘ MYB регуляторном элементе и даже более низкой занятости на транслоцированных энхансерах в результате этого подавления транскрипции MYB .Ретиноевая кислота, идентифицированная в нашей стратегии культивирования эмбрионов рыбок данио, таким образом, продемонстрировала сильное ингибирование роста опухоли ACC в моделях ксенотрансплантации путем нацеливания на MYB , что подчеркивает мощь нашей системы рыбок данио как инструмента доклинических открытий.

АСС — смертельное заболевание без эффективной терапии. Транслоцированные энхансеры из хромосомных перестроек MYB в ACC создают петли положительной обратной связи, которые приводят к сверхэкспрессии MYB и злокачественной трансформации.Здесь мы обнаружили, что ретиноевая кислота вызывает снижение уровней c-myb у рыбок данио и опухолей ACC, полученных от пациентов. Агонисты ретиноевой кислоты являются мощными супрессорами транскрипции MYB , поскольку RAR физически связывается в локусе MYB . Обработка ретиноевой кислотой вызывает снижение связывания h4K27ac и MYB на перемещенных энхансерах, что может ослабить онкогенные петли обратной связи, управляемые MYB , и вызвать гибель опухолевых клеток.

Наши функциональные исследования влияния ретиноевой кислоты на экспрессию MYB в ACC, вместе с клинической доступностью ATRA и известным профилем токсичности, дают веское обоснование для лечения ACC с помощью ATRA.Острый промиелоцитарный лейкоз из-за транслокации, приводящей к слиянию промиелоцитарного лейкоза / RARα, можно лечить разделенной дозой ATRA 45 мг / м 2 ежедневно (Degos and Wang, 2001). У этих пациентов лечение ATRA часто сочетается с химиотерапией антрациклинами или, у пациентов с низким риском (количество лейкоцитов <10 000 / мкл и количество тромбоцитов> 40 000 / мкл), с триоксидом мышьяка (Lo-Coco et al., 2016). Аберрантный белок, содержащий слияние RARα, чувствителен к ATRA и, следовательно, разрушается.Хотя механизм действия ATRA при остром промиелоцитарном лейкозе отличается от ингибирования транскрипции MYB , который мы предлагаем в ACC, известный профиль безопасности ATRA может определять его использование при ACC. Кроме того, мы установили RARα в качестве маркера, который можно использовать для мониторинга индукции ATRA в биоптатах пациентов с ACC, получавших ATRA в клинических испытаниях. Это, в сочетании с мониторингом циркулирующей опухолевой ДНК на предмет транслокации, будет способствовать корреляции ответа опухоли на ATRA с клинической активностью.

Примерно 10% опухолей ACC несут транслокации с участием родственного MYBL1 , но, насколько нам известно, не существует моделей PDX, несущих слияние MYBL1 . Сообщалось, что общие онкогенные пути в опухолях MYB и MYBL1 ACC являются взаимозаменяемыми, а транслокации часто усекают 3′-конец, обеспечивающий специфичность родственных MYB и MYBL1 (Brayer et al., 2016). Эти наблюдения предполагают, что ретиноевая кислота также может быть терапевтически полезной при опухолях ACC с реаранжировками MYBL1 , что является предметом будущих исследований.

В отличие от опухолей ACC x9 и x11, опухоли ACC x6 чувствительны к ингибиторам бромодомена (Drier et al., 2016). Опухоли ACC x9 являются NOTCH-зависимыми и проявляют чувствительность к ингибиторам гамма-секретазы (Stoeck et al., 2014). В отличие от этого, мы наблюдали чувствительность опухоли к ретиноевой кислоте через ACC x6 (включая MYB — TGFBR3 транслокаций) и x9 и x11 (оба включают MYB — NFIB транслокаций) примаграфт, что показывает, что наша стратегия нацелена на MYB может эффективно применяться против различных мутаций ACC в опухолях 2 и 3 степени.Учитывая почти универсальную распространенность активации MYB в опухолях ACC, использование нацеливания MYB может предложить широкую терапевтическую эффективность. Мы планируем протестировать однократную дозу ATRA у пациентов с метастатическим ОЦК, чтобы изучить безопасность и эффективность.

Наш анализ культуры плюрипотентных бластомеров позволил нам идентифицировать химические регуляторы экспрессии c-myb: GFP . Практически любая представляющая интерес репортерная линия рыбок данио может быть включена в эту универсальную систему, что делает ее мощным инструментом открытия для скрининга химических модуляторов образования опухоли, выявления регуляторов онкогенных событий, выполнения скрининга супрессоров опухолей и анализа новых методов лечения, направленных на другие опухоли.

Для скрининга каждого планшета с химической библиотекой в ​​двух экземплярах два 384-луночных планшета были покрыты 0,1% желатином. Эмбрионы C-myb: GFP (North et al., 2007) промывали водой для эмбрионов E3 и дехорионировали проназой. Эмбрионы промывали водой для эмбрионов E3, ресуспендировали в среде для бластомеров, переворачивали ~ 15 раз для диссоциации и фильтровали через фильтр с нейлоновой сеткой 40 мкм. Полученные единичные клетки были разделены на аликвоты по 40 мкл на лунку примерно из двух эквивалентов эмбриона на лунку и немедленно подвергнуты скринингу с использованием химических веществ из Национального института здравоохранения (720; Evotec), Библиотеки фармакологически активных соединений (1440; Sigma), ICCB Known Bioactives (480; Biomol), а также библиотеки рецепторов ядерных гормонов и Kinacore (1,200; ChemBridge) при 30 мкМ.Клетки культивировали в инкубаторе при 28 ° C с 5% CO 2 в течение 2 дней. Клетки окрашивали draq5 (Cell Signaling Technology) и визуализировали с помощью Cell Voyager 7000 (Yokogawa).

Затем было определено пороговое значение для 4-кратного изображения ядерной и флуоресцентной экспрессии из всей лунки и рассчитана процентная площадь с использованием ImageJ / Fiji. Контрольные лунки (≥200 на планшет) были идентифицированы с использованием квартильного исключения выбросов, и с использованием этих лунок была построена стандартная кривая с GFP по сравнению с ядерным окрашиванием в MatLab.По этой стандартной кривой рассчитывали остатки для каждой обработанной лунки и делили на стандартное отклонение в контрольных лунках, чтобы получить z-показатель для каждой химической обработки.

Исследования доза-ответ с использованием культур эмбрионов c-myb: GFP и последующие эксперименты были выполнены с агонистами ретиноевой кислоты, растворенными в ДМСО: AM580 (Tocris), 9-цис-ретиноевой кислоте (Sigma), п-гидроксианилиде ретиноевой кислоты ( Sigma), TTNPB (Tocris), AC261066 (Tocris) и ATRA (Sigma).

Для тестирования лекарств in vivo фрагменты опухоли ACC (Москалюк и др., 2011) от животных-хозяев имплантировали подкожно в бок голых мышей (CRL: ATH / NU). Как только опухоли достигли 125–250 мм 3 , мышей рандомизировали для получения носителя или лекарственного средства, разведенного в 10:90 ДМСО: 10% гидроксипропил-β-циклодекстрин перорально до тех пор, пока контроли не достигли конечной точки объема опухоли 1-2 см 3 ( от четырех до девяти мышей на группу: x5M1 и x6, четыре обработанных vs.девять органов управления автомобилем; x9, четыре обработанных против пяти контрольных носителя; x11, пять обработанных против восьми контрольных носителей). Мышам вводили ATRA (ACC x6 и x11: 4 мг / мл, 0,2 мл, плоская доза; ACC x9: 3 мг / мл, 0,2 мл, плоская доза) или изотретиноин (30 мг / мл, плоская доза 0,2 мл). . Наблюдали за ростом опухоли и взвешивали мышей дважды в неделю; исследования закончились, когда последняя группа достигла конечной точки объема опухоли. Никакие статистические методы не использовались для определения размера выборки, и не проводилось ослепление исследователей.После того, как были завершены долгосрочные исследования ингибирования роста опухоли, мыши, обработанные ATRA, перестали получать лечение и содержались дольше, как указано, для мониторинга сохранения опухоли после прекращения лечения. Приведены данные о весе, полученные в двух из трех исследований. В модели ACC x11 на 30-й день возникла проблема с бутылкой с водой, но когда лечение было остановлено, было отмечено общее увеличение веса, и в этих двух исследованиях мыши были в порядке. Для долгосрочных исследований ингибирования роста опухоли использовали модели ACC x6, x9 и x11, а примаграфт собирали по завершении исследования.Краткосрочные кинетические исследования были также предприняты с примагрантами ACC x9 и x5M1 с использованием 3-х дневного лечения ATRA. Все процедуры на животных, использованные в этом исследовании, были одобрены IACUC в South Texas Accelerated Research Therapeutics, Сан-Антонио, Техас.

ChIP-seq выполняли на примагрантах ACC x9 (из краткосрочных кинетических исследований), обработанных носителем или ATRA в течение 3 дней. Замороженные примагранты механически диссоциировали, сшивали формальдегидом и собирали.ChIP выполняли, как описано ранее (Lee et al., 2006), с 10 мкг антител против c-myb (A304-136A; Bethyl), pan-RAR (sc-773X; Santa Cruz) и h4K27ac (ab4729; Abcam). Библиотеки секвенирования были созданы с использованием набора NEBNext Multiplex Oligos Kit (New England Biolabs) и секвенированы на приборе Hi-Seq 2500 (Illumina).

Все наборы данных ChIP-seq были согласованы с версией сборки UCSC hg19 генома человека с использованием Bowtie2 (версия 2.2.1; Langmead and Salzberg, 2012) со следующими параметрами: -end-to-end, -N0, -L20. Мы использовали алгоритм поиска пиков MACS2 версии 2.1.0 (Zhang et al., 2008) для определения областей пиков ChIP-seq с порогом обогащения 0,05 q для всех наборов данных. Обогащение ChIP-seq определяли, как описано ранее (Trompouki et al., 2011), в области размером 5 т.п.н. (в пересчете на миллион) с центром в областях обогащенных пиков ( n = 1872) данных наборов данных MYB. Наборы данных депонированы в Gene Expression Omnibus под номером доступа.GSE98008.

Тепловые карты связывания ChIP-seq были сгенерированы с использованием нормированных на вход результатов выходных данных вызова пика MACS. Полученные файлы bedGraph были преобразованы в файлы BigWig. Затем эти файлы были обработаны с помощью инструментов computeMatrix и plotHeatmap в пакете deeptools 3.0. Все цифры сосредоточены на вызванных пиках из вывода macs2. Этим пикам были присвоены гены с использованием GREAT для поиска генов в пределах 15 т.п.н. от пиков.Пики, которые имели гены, которые имели ассоциированное кратное изменение 1,2 по RNA-seq, были извлечены и использованы для получения дополнительных фигур.

суперэнхансеров были идентифицированы, как описано ранее (Hnisz et al., 2013). Пики h4K27ac из обработанных носителем примаграфт АСС использовали для определения местоположения энхансеров, а сигнал h4K27ac за вычетом входного контроля использовали для ранжирования энхансеров на основе обогащения.

Благодарим Ю.Zhou, S. Yang, A. Lichtig, R. Mathieu и T. Schlaeger за техническую помощь, а также J. Aster, E. Hagedorn и R. Young за полезные обсуждения. FACS был проведен Исследовательским центром проточной цитометрии Бостонской детской больницы. Иммуногистохимия была выполнена Центром специализированной гистопатологии Дана-Фарбер / Гарвардского онкологического центра.

Эта работа была поддержана Фондом исследований аденоидной кистозной карциномы; Гарвардский институт стволовых клеток; Медицинский институт Говарда Хьюза; Национальные институты здравоохранения гранты R01 HL048801, P01 HL032262, P30 DK049216, R01 DK053298, U01 HL100001 и R24 DK092760 для L.И. Зон; награда DFS-146184 за докторскую степень за зарубежные исследования Канадских институтов здравоохранения Дж. Мандельбауму; и постдокторская стипендия Американского онкологического общества 122577PF1214601DDC И.А. Шестопалов.

Л.И. Зон является основателем и держателем акций компаний Fate Therapeutics, Scholar Rock и CAMP4 Therapeutics. Авторы не заявляют о других конкурирующих финансовых интересах.

Авторские взносы: Л.И. Зон, Дж. Мандельбаум, И.А. Шестопалов разработал исследование. Дж. Мандельбаум, И.А. Шестопалов, Р. Хендерсон, Б. Кнучел и М.Дж. Вик провели эксперименты, проанализировали данные и дали концептуальные советы. Л.И. Зон, Дж. Мандельбаум, Н.Г. Рукопись написал Чау. Все авторы обсудили результаты и просмотрели рукопись.

Нокдаун гистон-метилтрансферазы WHSC1 индуцирует апоптоз и ингибирует пролиферацию клеток и опухолевый генез при аденоидной кистозной карциноме слюнной железы

Abstract

Предпосылки / цель: Аденоидно-кистозная карцинома слюнной железы (SACC) является наиболее частым злокачественным новообразованием слюнной железы и предрасположенностью к выживанию. .Настоящее исследование направлено на изучение роли гистон-метилтрансферазы WHSC1 в SACC. Материалы и методы. Образцы SACC человека оценивали на экспрессию WHSC1 с помощью ОТ-ПЦР и иммуногистохимии. Были изучены эффекты нокдауна WHSC1 на пролиферацию клеток SACC, клеточный цикл, образование клонов и опухолевых сфер и апоптоз, а также на экспрессию родственных генов. Модель SACC на мышах с ксенотрансплантатом использовали для оценки in vivo эффектов нокдауна WHSC1 на онкогенез SACC.Результаты: экспрессия WHSC1 повышалась в тканях SACC человека (p <0,01). Нокдаун WHSC1 в клетках SACC значительно ингибировал пролиферацию клеток, образование клонов и опухолевых сфер (p <0,05). Распределение клеток в фазах S и G 2 / M было значительно снижено при нокдауне WHSC1 (p <0,05). Нокдаун WHSC1 значительно увеличивал апоптоз клеток SACC (p <0,05). Гены c-Myc, сурвивина, Bcl-2 и циклина B1 значительно подавлялись нокдаун-клетками WHSC1 (p <0,05).Нокдаун WHSC1 значительно снижал модификацию h4K36me2 промотора гена MYC в клетках SACC и онкогенез клеток SACC in vivo (p <0,05). Заключение: нокдаун WHSC1 ингибировал пролиферацию клеток, индуцировал апоптоз и влиял на туморогенез в SACC.

Аденоидно-кистозная карцинома слюнной железы (SACC) возникает из секреторных эпителиальных клеток слюнных желез (1) и является наиболее частым злокачественным новообразованием слюнных желез, на которое приходится около 25-50% злокачественных опухолей большой или малой слюнной железы. железы соответственно (2-4).SACC демонстрирует уникальные характеристики, которые приводят к плохому прогнозу и низкой общей выживаемости (5). Недавние открытия молекулярной патологии предполагают, что генетическая транслокация и / или сверхэкспрессия онкопротеинов важны для онкогенеза и диагностики слюнных желез. Исследования показали, что повторяющееся слияние генов MYB-NFIB является основным геномным признаком SACC (6, 7). Однако необходимы дальнейшие молекулярно-генетические исследования для выявления биомаркеров, а также терапевтических целей или прогностических факторов ACC.

Модификация метилирования гистонов — важный процесс, вовлеченный в регуляцию экспрессии онкогенных генов и контролируемый гистоновыми метилтрансферазами и деметилазами. WHSC1 (также известная как NSD2) представляет собой гистоновую метилтрансферазу, которая опосредует диметилирование гистона 3 лизина 36 (h4K36me2). Было обнаружено, что метилирование h4K36 связано с активацией транскрипции при многих видах рака 8). Повышенная экспрессия WHSC1 была обнаружена во многих солидных опухолях, таких как множественная миелома, рак простаты, рак груди и рак головы и шеи (8-10). Исследования in vitro показали, что WHSC1 модулирует Ras-связанные Транскрипция субстрата 1 ботулинического токсина C3 (Rac1), фактора транскрипции 1 семейства твистов (TWIST1) и ядерного фактора κB (NF-κB), способствующих онкогенезу и метастазированию (11, 12). Однако роль WHSC1 в SACC остается неясной.

Таблица I.

Праймеры, используемые для количественной ПЦР в реальном времени.

Таблица II.

Праймеры, используемые для анализа ChIP-qPCR.

В настоящем исследовании было обнаружено, что WHSC1 активируется в SACC человека.Были исследованы эффекты нокдауна WHSC1 в клетках SACC на пролиферацию, апоптоз и туморогенез.

Материалы и методы

Пациенты и образцы. Всего было получено 23 аденоидно-кистозных карциномы слюнной железы и 23 сопоставимых образца нормальной слюнной железы паракарциномы от пациентов, перенесших операцию в период с 2002 по 2014 год в больнице провинции Шаньдун при университете Шаньдун. Диагноз подтвержден гистологически опытными патологами.Исследование было одобрено Комитетом по этике исследований дочерней больницы провинции Шаньдун Университета Шаньдун (номер одобрения: 2018-230), и от всех пациентов было получено письменное информированное согласие.

Иммуногистохимия (ИГХ). ИГХ проводили на фиксированных формалином и залитых парафином предметных стеклах толщиной 5 мкм. После депарафинизации, регидратации, поиска антигена и эндогенной блокады пероксидазы. Затем образцы инкубировали со следующими антителами: анти-WHSC1 (ab75359, Abcam, Кембридж, Великобритания), анти-расщепленная каспаза-3 (9661, Cell Signaling Technology, Бостон, США), анти-Ki67 (GB13030-2, Servicebio, Ухань, П.Р. Китай) при 4 ° С в течение 8-10 ч. Затем срезы инкубировали со вторичным антителом (7074, Cell Signaling Technology, Бостон, Массачусетс, США) в течение 30 минут при комнатной температуре. Проявление цвета выполняли с 3’-диаминобензидином (DAB) (K5007, DAKO, Копенгаген, Дания). Ядра слегка окрашивали гематоксилином. Срезы просматривали с помощью микроскопа (DM 4000B, Leica, Wetzlar, Германия), и положительные клетки распознавали по появлению коричневого окрашивания. Уровни экспрессии оценивали по индексам окрашивания с использованием метода количественной оценки по 10 точкам (13).Баллы от 0 до 5 указывают на низкую экспрессию, тогда как баллы от 6 до 10 указывают на высокую экспрессию.

Культура клеток. Клеточные линии аденоидной кистозной карциномы слюнной железы человека SACC-83 и SACC-LM были приобретены из Американской коллекции типовых культур. Клетки выращивали в среде DMEM (Hyclone, UT, США) с 10% FBS (Gibco, Калифорния, США) и антибиотиками (пенициллин 100 Ед / мл, стрептомицин 100 мкг / мл) при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO. 2 .

Трансфекция shРНК. Были сконструированы две WHSC1-специфичные короткие шпилечные РНК (WHSC1-KD1 и WHSC1-KD2 shRNA) и клонированы в плазмиду pLVX-shRNA1.Последовательность бессмысленного скремблирования использовалась в качестве отрицательного контроля. Плазмиды были упакованы в лентивирус с использованием системы из трех плазмид, pLVX-shRNA1 с целевой последовательностью, psPAX2 и pMD2G. Клетки SACC-83 и SACC-LM трансфицировали и проверяли пуромицином 2 мг / мл в течение 2 недель. Последовательность shRNA WHSC1-KD1 была TGCCAATAACACGTCCACT, а последовательность shRNA WHSC1-KD2 была CCCTTCGCAGTGTTTGTCT.

Рисунок 1.

Повышающая регуляция гистон-метилтрансферазы WHSC1 в SACC человека. (A) Повышающая регуляция WHSC1 была обнаружена в когорте GSE59701.(B) Уровни мРНК WHSC1 в опухоли и соответствовали нормальным тканям (парный t-критерий). (C и D) Иммуногистохимическое определение экспрессии WHSC1 в образцах SACC и нормальных слюнных железах. * p <0,01 по сравнению с нормальными тканями.

Анализ пролиферации клеток. Клеточную пролиферацию измеряли с помощью анализа CCK8. Клетки (5 × 10 3 ) переносили в 96-луночный планшет в RPMI 1640, содержащем 10% FBS. Через 24, 48 и 72 часа инкубации в каждую лунку на 2 часа добавляли реагент CCK8 (разведение 1:10).Оптическую плотность (OD) при длине волны 450 нм определяли с помощью ридера для микропланшетов (Bio-Rad, Калифорния, США). Кривые пролиферации строили для каждой из групп клеток.

Анализ эффективности клонирования. 1000 клеток добавляли в каждую лунку 6-луночного планшета, полученные колонии фиксировали, окрашивали 0,1% кристаллическим фиолетовым на 7 день и подсчитывали количество колоний.

Формирование опухолевой сферы. Суспензии отдельных клеток добавляли в планшеты со сверхнизким прикреплением в определенной среде при плотности 1000 клеток / лунку.Определенная бессывороточная среда содержала DMEM / F-12 с добавкой B27 (1:50), EGF (20 нг / мл) и FGF (10 нг / мл). Через семь дней после непрерывного культивирования количество сфер регистрировали под микроскопом. Через день добавляли половину объема среды. Изображения были получены на 7-й день с помощью инвертированного микроскопа, количественно оценивались только сферы размером более 100 мкм.

Анализ апоптоза. Процент клеток, подвергающихся апоптозу, оценивали с помощью проточной цитометрии (Beckman Gallios, Brea, CA, USA).После инкубации с цисплатином в течение 48 часов клетки собирали, промывали и ресуспендировали в 100 мкл буфера для окрашивания с добавлением 1 мкл 7-AAD (559925, BD Biosciences, Нью-Джерси, США) и 5 ​​мкл Annexin-V-APC (556421, BD Biosciences). ).

Анализ клеточного цикла. Анализ 5-этинил-2 дезоксиуридина (EdU) выполняли в соответствии с инструкциями производителя (C0071L, Beyotime, Шанхай, Китай), клетки SACC-83 и SACC-LM инкубировали с EdU в течение 2 часов.

Извлечение РНК и количественная ПЦР в реальном времени.Общую РНК выделяли из клеток с использованием реагента TRIzol (15596-018, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). 1 мкг тотальной РНК подвергали обратной транскрипции с использованием набора TaKaRa RT-PCR (Takara, Shiga, Japan) в соответствии с инструкциями производителя. с последующей амплификацией ПЦР со специфическими праймерами (таблица I). Данные были проанализированы методом относительной стандартной кривой и нормализованы к экспрессии GAPDH . Относительную экспрессию РНК в клетках рассчитывали с использованием метода 2 -ΔΔCt .

Вестерн-блоттинг. Экстракты белковых клеток получали с буфером RIPA (Roche Diagnostics, Индианаполис, Индиана, США). 30 мкг белкового лизата разделяли с помощью гель-электрофореза в 10% SDS – PAGE и электрофоретически переносили на мембрану из поливинилиденфторида (PVDF) (Millipore, Bedford, MA, USA). Мембраны инкубировали с 10% обезжиренным молочным раствором для блокирования неспецифического связывания, а затем с анти-c-Myc (9402, Cell Signaling Technology, Бостон, Массачусетс, США), анти-WHSC1 (ab75359, Abcam, Кембридж, Великобритания). , анти-Bcl-2 (4223S, Cell Signaling Technology), антициклин B1 (4138, Cell Signaling Technology), антитела против сурвивина (2808, Cell Signaling Technology) или антитела против GAPDH (5174S, Cell Signaling Technology).После двукратной промывки физиологическим раствором с трис-буфером мембраны инкубировали с соответствующими вторичными антителами, конъюгированными с HRP, в течение 2 часов при комнатной температуре. Анализ электрохемилюминесценции выполняли в соответствии с инструкциями производителя (WBKLS0050, Millipore).

Рисунок 2. Нокдаун

WHSC1 подавляет рост клеток SACC и раковых стволовых клеток. (A и B) Рост in vitro контрольных клеток и клеток WHSC1-KD, SACC-83 и SACC-LM по оценке с помощью анализа CCK-8. (C и D) Анализ образования клонов в контрольных клетках и клетках WHSC1-KD.(E и F) Формирование опухолевой сферы контрольных и WHSC1-KD, SSACC-83 и HSACC клеток, * p <0,05 по сравнению с контролем.

Исследование in vivo. голых мышей-самцов BALB / C в возрасте 4-6 недель и массой 20-25 г были приобретены в SHANGHAI SLAC (Шанхай, Китай). Всех мышей содержали в среде с фильтром HEPA при 24-25 ° C и влажности 50-60%. Все эксперименты на животных были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных в учреждениях и проводились в соответствии с Руководством NIH.

Рисунок 3.

Влияние нокдауна WHSC1 на клеточный цикл и апоптоз. (A и B) Контрольные клетки и клетки WHSC1-KD SACC-83 и SACC-LM инкубировали с 5-этинил-2 дезоксиуридином (EdU) в течение двух часов и окрашивали антителом против EDU и 7AAD. (C и D) Клетки окрашивали аннексином V и 7AAD и анализировали проточной цитометрией. * р <0,05 по сравнению с контролем.

Ксенотрансплантатные мышиные модели аденоидной кистозной карциномы слюны были созданы путем подкожной инъекции 1 × 10 6 трансфицированных клеток SACC в бок голых мышей.Рост опухоли измеряли еженедельно штангенциркулем. Объем опухоли рассчитывали по формуле (L × W 2 ) × ½, где W и L представляют перпендикулярный малый и большой размер, соответственно. Всех животных умерщвляли через 21 день после имплантации опухолевых клеток. При вскрытии опухоль удалили и взвесили.

Анализ ChIP-qPCR. 2 × 10 7 Клетки SACC-83 и WHSC1-нокдаун SACC-83 сшивали, лизировали и разрезали до примерно 200-700 пар оснований ДНК с использованием UCD-300 (Bioruptor, BE).ChIP выполняли с использованием набора Magnetic ChIP в соответствии с инструкциями производителя (17-371, Millipore). Затем проводили количественную оценку ДНК, обогащенной ChIP, с помощью qPCR. Используемые ChIP-антитела были анти-h4K36me2 (61019, Active Motif, CA, USA) и нормальным кроличьим IgG. Используемые праймеры перечислены в таблице II.

Статистический анализ. Все эксперименты были повторены не менее трех раз, как указано. Данные выражены как среднее ± стандартное отклонение. Все статистические анализы были выполнены с использованием SPSS16.0 (SPSS inc., Чикаго, Иллинойс, США). Сравнение данных между двумя группами проводилось с использованием теста Стьюдента t . Статистически значимым считалось значение p <0,05.

Результаты

Экспрессия WHSC1 активируется в SACC человека. Для оценки экспрессии WHSC1 в образцах SACC человека были получены наборы данных GSE59701 с веб-сайта GEO, и был записан список экспрессии 20 201 гена из 12 образцов SACC с совпадающими нормальными тканями.Экспрессия мРНК WHSC1 была значительно выше в тканях SACC по сравнению с парными нормальными контролями ( p <0,01) (рис. 1A). Экспрессия WHSC1 была дополнительно исследована на образцах SACC. Анализ RT-qPCR показал, что экспрессия мРНК WHSC1 также была значительно выше в биоптатах 23 пациентов с SACC по сравнению с образцами их нормальной слюнной железы с паракарциномой ( p <0,01) (Рисунок 1B). Иммуногистохимический анализ также выявил значительно более высокую экспрессию WHSC1 в биоптатах 23 пациентов с SACC по сравнению с у них паракарцинома нормальных образцов слюнной железы ( p <0.05) (Рисунок 1C и D).

Рисунок 4.

WHSC1 регулирует гены, связанные с апоптозом и стволовостью клеток, опосредуя модификацию h4K36me2. (A) RT-qPCR генов, связанных со стволовостью, ростом опухоли и апоптозом, в контрольных клетках и клетках WHSC1-KD SACC-83. (B) Вестерн-блоттинг указанных белков в контрольных клетках и клетках WHSC1-KD SACC-83. GAPDH служил контролем загрузки. (C) ChIP-qPCR анализ обогащения h4K36me2 промотором гена MYC в контрольных клетках и клетках WHSC1-KD SACC-83. * p <0,05 по сравнению с контролем.

Нокдаун WHSC1 подавляет рост клеток SACC и раковых стволовых клеток. Нокдаун WHSC1 в клетках SACC-83 и SACC-LM выполняли путем трансфекции их WHSC1-специфической короткой шпилечной РНК. Эффект нокдауна WHSC1 на рост клеток оценивали путем изучения пролиферации клеток, а также образования клонов и опухолевых сфер. Клетки SACC-83 и SACC-LM, трансфицированные WHSC1-KD1 или WHSC1-KD2, показали значительно сниженную пролиферацию клеток по сравнению с контрольными клетками SACC-83 и SACC-LM ( p <0.05) (Рисунок 2A и B). Образование клонов было значительно ингибировано в клетках SACC-83 и SACC-LM, трансфицированных WHSC1-KD1 или WHSC1-KD2, по сравнению с контролем клеток SACC-83 и SACC-LM ( p <0,05) (рис. 2C и 2D).

Раковые стволовые клетки (РСК) тесно коррелируют с онкогенезом многих солидных опухолей (14, 15). Интересно, что нокдаун WHSC1 заметно снижает способность клеток SACC образовывать сферы опухоли (рис. 2E и F), предполагая, что WHSC1 может влиять на свойства раковых стволовых клеток в SACC.

Влияние нокдауна WHSC1 на клеточный цикл. Эффект нокдауна WHSC1 на клеточный цикл оценивали с помощью анализа Edu. Как показано на фиг. 3A и B, распределение клеток в фазе S и G 2 / M было значительно снижено в клетках SACC-83 и SACC-LM, трансфицированных WHSC1-KD1 или WHSC1-KD2, по сравнению с SACC-83 и SACC- LM-клеточный контроль ( p <0,05).

WHSC1 регулирует гены, связанные с апоптозом и стволовостью клеток. Эффекты нокдауна WHSC1 на апоптоз клеток оценивали с помощью анализа аннексина V-7AAD.WHSC1 нокдаун в клетках SACC-83 и SACC-LM значительно увеличивал апоптоз клеток по сравнению с контролем клеток SACC-83 и SACC-LM ( p <0,05) (рис. 3C и D).

Рисунок 5. Нокдаун

WHSC1 ингибирует прогрессию SACC in vivo. (A) Макроскопическое изображение размера опухоли (верхняя панель) и гистограмма, показывающая изменение объема в указанные моменты времени и вес опухоли на 21 день, когда мышей умерщвляли. (B) Размер опухоли оценивали в указанные дни, объем опухоли рассчитывали по формуле V = 0.5 * a * b * b (a — длинный диаметр, b — короткий). (C) Вес опухоли измеряли, когда мышей умерщвляли на 21 день. (D) ИГХ-окрашивание расщепленной каспазы 3 и Ki67 в репрезентативных опухолевых тканях контрольной группы и группы WHSC1-KD. * p <0,05 по сравнению с контролем.

c-Myc, фактор, связанный с дифференцировкой стволовых клеток опухоли, заметно подавлялся в клетках SACC-83 и SACC-LM, трансфицированных WHSC1-KD1 или WHSC1-KD2, по сравнению с контролем ( p <0.05) (Рисунок 4A и B). Сурвивин и Bcl-2, два антиапоптотических фактора (16, 17), значительно ингибировались в клетках SACC-83 и SACC-LM, трансфицированных WHSC1-KD1 или WHSC1-KD2, по сравнению с контролем ( p <0,05) (Рисунок 4B). Кроме того, циклин B1, который связан с контрольной точкой G 2 / M (18), также был снижен в клетках SACC-83 и SACC-LM, трансфицированных WHSC1-KD1 или WHSC1-KD2, по сравнению с контролем ( p <0,05) (рис. 4В). Эти результаты показывают, что нокдаун WHSC1 подавляет экспрессию апоптотических и связанных со стволовостью генов в клетках SACC.

WHSC1 опосредует модификацию h4K36me2 в локусах MYC. WHSC1 представляет собой гистон-метилтрансферазу h4K36me2. Метилирование h4K36 способствует транскрипции гена. Анализ ChIP-qPCR продемонстрировал, что нокдаун WHSC1 снижает модификацию h4K36me2 в промоторе гена MYC (рис. 4C). Эти данные показали, что истощение WHSC1 может приводить к более конденсированному хроматину в локусе гена MYC и тем самым ингибировать транскрипцию c-Myc в клетках SACC. Следовательно, WHSC1 может напрямую регулировать экспрессию c-Myc, опосредуя модификацию h4K36me2.

Нокдаун WHSC1 ингибирует онкогенез SACC in vivo. Эффекты нокдауна WHSC1 на онкогенез оценивали на мышиной модели SACC. Животные с опухолью, полученной из клеток SACC-83 и SACC-LM, трансфицированных WHSC1-KD1 или WHSC1-KD2, показали значительно меньшие размер и вес опухоли по сравнению с контролем ( p <0,05) (фиг. 5A- C). Количество расщепленных положительных по каспазе 3 клеток было значительно увеличено в клетках SACC-83 и SACC-LM, трансфицированных WHSC1-KD1 или WHSC1-KD2, по сравнению с контролем ( p <0.05). Однако экспрессия Ki67 была сходной во всех группах (рис. 5D). Эти результаты демонстрируют, что нокдаун WHSC1 подавляет онкогенез и усиливает апоптоз in vivo .

Обсуждение

В настоящем исследовании было обнаружено, что WHSC1 активируется в SACC человека, а активация WHSC1 ингибирует апоптоз клеточной линии SACC как in vitro , так и in vivo . WHSC1 регулирует транскрипцию ключевых внутриклеточных сигнальных молекул, включая BCL-2 и SOX2, опосредуя их модификацию h4K36me2.

В этом отчете показано, что высокие уровни WHSC1 в клетках SACC способствовали пролиферации и ингибировали апоптоз посредством эпигенетического репрограммирования подмножества генов, что указывает на ген MYC . Нокдаун WHSC1 значительно снижает модификации h4K36me2 в промоторной области MYC, что, вероятно, приводит к более конденсированному хроматину и снижению транскрипции MYC.

Наши результаты подтверждают тесную взаимосвязь между эпигенетическим регулятором WHSC1 и ключевыми внутриклеточными факторами и молекулами транскрипции.MYC является ключевым геном, связанным со стволовостью, и онкогенным драйвером, который способствует злокачественной трансформации многих опухолей (19, 20). Нокдаун WHSC1 значительно снижает уровень модификации h4K36me2 в локусе гена MYC, что приводит к ингибированию транскрипции этого ключевого онкогена.

В заключение, экспрессия WHSC1 была повышена у пациентов с SACC человека. Нокдаун WHSC1 в клеточных линиях SACC был связан со снижением пролиферации клеток, усилением апоптоза и снижением туморогенеза. WHSC1 может быть потенциальной мишенью для эффективной терапии SACC.

Выражение признательности

Это исследование финансируется грантами Национального фонда естественных наук Китая (№№ 81771087 и 81470755) и Шаньдунского провинциального фонда естественных наук, Китай (№ ZR2017BH005).

Сноски

  • ↵ * Эти авторы внесли равный вклад в это исследование.

  • Вклад авторов

    CHAO LIU и JIA-WEI ZHENG разработали исследование, проанализировали данные, подготовили рисунки и написали черновик рукописи; CHAO LIU и ZE-LIANG ZHAO выполнили исследования in vitro ; HAI-WEI WU и LING ZHANG выполнили исследования in vivo ; ЧЖИЦЗЯН ЯН и РОБЕРТ М.ХОФФМАН руководил исследованием и отредактировал рукопись.

  • Эта статья находится в свободном доступе в Интернете.

  • Конфликт интересов

    Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в отношении данного исследования.

  • Получено 19 января 2019 г.
  • Исправление получено 4 февраля 2019 г.
  • Принято 5 февраля 2019 г.Джордж Дж. Делинасиос), Все права защищены

Публикации | Блэклоу Лаб

5. PMCID: PMC5657508.

Susa KJ, Seegar TCM, Blacklow SC, Kruse AC. Динамическое взаимодействие между CD19 и тетраспанином CD81 контролирует перенос корецепторов В-клеток. Элиф. 2020 апр 27; 9. pii: e52337. DOI: 10.7554 / eLife.52337.

Роджерс Дж. М., Го Б., Иган Э. Д., Астер Дж. К., Адельман К., Блэклоу СК.MAML1-зависимые гены, отвечающие за Notch, обнаруживают различные потребности в кофакторах для активации транскрипции. Mol Cell Biol. 2020 16 марта. Pii: MCB.00014-20. DOI: 10.1128 / MCB.00014-20.

Rome KS, Stein SJ, Kurachi M, Petrovic J, Schwartz GW, Mack EA, Uljon S, Wu WW, DeHart AG, McClory SE, Xu L, Gimotty PA, Blacklow SC, Faryabi RB, Wherry EJ, Jordan MS, Pear WS.Trib1 регулирует дифференцировку Т-клеток во время хронической инфекции, ограничивая эффекторную программу. J Exp Med. 2020 4 мая; 217 (5). pii: e201. DOI: 10.1084 / jem.201.

Adhikari AA, Seegar TCM, Ficarro SB, McCurry MD, Ramachandran D, Yao L, Chaudhari SN, Ndousse-Fetter S, Banks AS, Marto JA, Blacklow SC, Devlin AS.Разработка ковалентного ингибитора бактериальных гидролаз желчных солей кишечника. Nat Chem Biol. 2020 Март; 16 (3): 318-326. DOI: 10.1038 / s41589-020-0467-3.

Джарретт С.М., Сигар ТКМ, Эндрюс М., Адельмант Дж., Марто Дж. А., Астер Дж. С., Блэклоу СК. Удлинение стека анкириновых повторов внутриклеточного домена Notch с помощью NRARP способствует ингибированию передачи сигналов Notch с помощью обратной связи.Sci Signal. 2019 5 ноября; 12 (606). pii: eaay2369. DOI: 10.1126 / scisignal.aay2369.

Seegar TC, Blacklow SC. Доменная интеграция белков семейства ADAM: новые темы структурных исследований. Exp Biol Med (Maywood). 2019 декабрь; 244 (17): 1510-1519. DOI: 10.1177 / 1535370219865901.

Драбек А.А., Лопаро Дж. Дж., Блэклоу СК.Анализ движения связанных частиц с увеличением потока для протеолиза одиночных молекул. Биохимия. 2019 21 мая; 58 (20): 2509-2518. DOI: 10.1021 / acs.biochem.9b00106.

Rogers JM, Waters CT, Seegar TCM, Jarrett SM, Hallworth AN, Blacklow SC, Bulyk ML. Биспецифический фактор транскрипции форкхед FoxN3 распознает два разных мотива с разными формами ДНК.Mol Cell. 2019 18 апреля; 74 (2): 245-253.e6. DOI: 10.1016 / j.molcel.2019.01.019.

Петрович Дж., Чжоу Ю., Фасолино М., Гольдман Н., Шварц Г. В., Мумбах М. Р., Нгуен СК, Рим К.С., Села И., Сапатаро З., Блэклоу СК, Крулак М.Дж., Ши Дж., Астер Дж. К., Джойс Е. Ф., Литтл СК, Вахеди Г, Груша WS, Фаряби РБ. Онкогенный Notch способствует долгосрочному регулирующему взаимодействию в гиперсвязанных трехмерных кликах.Mol Cell. 2019 21 марта; 73 (6): 1174-1190.e12. DOI: 10.1016 / j.molcel.2019.01.006.

Ла-Рошель-младший, Фодор М., Вемулапалли В., Мохсени М., Ван П., Стамс Т., ЛаМарш М.Дж., Чопра Р., Акер М.Г., Блэклоу СК. Структурная реорганизация SHP2 с помощью онкогенных мутаций и последствия для устойчивости онкопротеинов к аллостерическому ингибированию.Nat Commun. 30 октября 2018 г .; 9 (1): 4508. DOI: 10.1038 / s41467-018-06823-9.

Твериахина Л., Шустер-Госслер К., Джарретт С.М., Андравес М.Б., Рорбах М., Блэклоу С.К., Госслер А. Эктодомены определяют функцию лиганда in vivo и селективность DLL1 и DLL4 по отношению к NOTCh2 и NOTCh3 in vitro. Элиф. 2018 5 октября; 7. pii: e40045.DOI: 10.7554 / eLife.40045.

Ван Дж., Эразо Т., Фергюсон FM, Бакли Д.Л., Гомес Н., Муньос-Гвардиола П., Диегес-Мартинес Н., Денг Х, Хао М., Массефски В., Федоров О., Оффей-Аддо Н.К., Парк П.М., Дай Л., ДиБона A, Бехт К., Ким Н.Д., МакКаун М.Р., Робертс Дж. М., Чжан Дж., Сим Т., Алесси Д. Р., Брэднер Дж. Э., Лизкано Дж. М., Блэклоу СК, Ци Дж., Сюй Х, Грей Н.С.Структурные и атропоизомерные факторы, определяющие селективность пиримидобензодиазипинонов как ингибиторов киназ и бромодоменов. ACS Chem Biol. 2018 21 сентября; 13 (9): 2438-2448. DOI: 10.1021 / acschembio.7b00638.

Ловендаль К.Н., Блэклоу СК, Гордон В.Р. Молекулярный механизм активации Notch. Adv Exp Med Biol.2018; 1066: 47-58. DOI: 10.1007 / 978-3-319-89512-3_3.

Fodor M, Price E, Wang P, Lu H, Argintaru A, Chen Z, Glick M, Hao HX, Kato M, Koenig R, LaRochelle JR, Liu G, McNeill E, Majumdar D, Nishiguchi GA, Perez LB, Париж Дж., Куинн С.М., Рэмси Т., Сендзик М., Шульц М.Д., Уильямс С.Л., Стамс Т., Блэклоу С.К., Акер М.Г., ЛаМарш М.Дж.Двойное аллостерическое ингибирование фосфатазы SHP2. ACS Chem Biol. 2018; 13 (3): 647-656. DOI: 10.1021 / acschembio.7b00980. PMID: 29304282.

ЛаРошель Дж. Р., Фодор М., Эллегаст Дж. М., Лю Х, Вемулапалли В., Мохсени М., Стамс Т., Бурлаж С. Дж., Стегмайер К., Ламарш М. Дж., Акер М. Г., Блэклоу СК. Идентификация аллостерического бензотиазолопиримидонового ингибитора онкогенной протеинтирозинфосфатазы SHP2.Bioorg Med Chem. 2017; 25 (24): 6479-6485. DOI: 10.1016 / j.bmc.2017.10.025. PMID: 2

57.

Сигар, ТКМ, Киллингсворт, Л.Б., Саха, Н., Мейер, Пенсильвания, Патра, Д., Циммерман, Б., Джейнс, П.У., Рубинштейн, Э, Николов, Д.Б., Скиниотис, Г., Круз, А.С., и Блэклоу, Южная Каролина. Структурная основа регулируемого протеолиза α-секретазой ADAM10.Cell 2017; 171: 1638-1648.e7. PMID: 29224781. PMCID: PMC5773094.

Pajcini KV, Xu L, Shao L, Petrovic J, Palasiewicz K, Ohtani Y, Bailis W., Lee C, Wertheim GB, Mani R, Musuthamy N, Li Y, Meijerink JPP, Blacklow SC, Faryabi RB, Cherry S, Pear WS. MAFB усиливает онкогенную передачу сигналов Notch при остром лимфобластном лейкозе Т-клеток.Sci Signal. 2017; 10 (505). pii: eaam6846. DOI: 10.1126 / scisignal.aam6846. PMID: 2

97. PMCID: PMC5885022.

Sajed DP, Faquin WC, Carey C, Severson EA, Afrogheh AH, Johnson CA, Blacklow SC, Chau NG, Lin DT, Krane JF, Jo VY, Garcia JJ, Sholl LM, Aster JC. Диффузное окрашивание активированного NOTCh2 коррелирует со статусом мутации NOTCh2 и связано с худшим исходом при аденоидной кистозной карциноме.Am J Surg Pathol. 2017 ноя; 41 (11): 1473-1482. DOI: 10.1097 / PAS.0000000000000945. PMID: 28

Ryan RJH, Petrovic J, Rausch DM, Zhou Y, Lareau CA, Kluk MJ, Christie AL, Lee WY, Tarjan DR, Guo B, Donohue LKH, Gillespie SM, Nardi V, Hochberg EP, Blacklow SC, Weinstock DM, Faryabi РБ, Бернштейн Б.Е., Астер Дж.С., Груша В.С.Регул B-клеток связывает Notch с нижележащими онкогенными путями в лимфомах малых B-клеток. Cell Rep.2017; 21 (3): 784-797. DOI: 10.1016 / j.celrep.2017.09.066. PMID: 2

44. PMCID: PMC5687286.

Severson E, Arnett K, Wang H, Zang C, Liu H, Pear WS, Liu X, Blacklow SC * и Aster JC *. Полногеномная идентификация и характеристика парных участков последовательностей, связывающих транскрипционный комплекс Notch, в лейкозных клетках.Сигнализация науки 2017; 10: 477. DOI: 10.1126 / scisignal.aag1598. PMID: 28465412.

* Соавторы-корреспонденты.

McMillan BJ, Tibbe C, Drabek AA, Seegar TCM, Blacklow SC * и Klein T *. Структурные основы регуляции комплексов ESCRT-III Lgd. Cell Rep.2017, 30 мая; 19 (9): 1750-1757. DOI: 10.1016 / j.celrep.2017.05.026. PMID: 28564595. PMCID: PMC5528166.

* Соавторы-корреспонденты.

Choi SH, Severson E, Pear WS, Liu XS, Aster JC *, Blacklow SC *. Общая онкогеномная программа передачи сигналов NOTCh2 и NOTCh4 при Т-клеточном остром лимфобластном лейкозе. PLoS One 2017; 12 (10): e0185762. DOI: 10,1371 / журнал.pone.0185762. PMID: 269. PMC5638296.

McMillan BJ, Zimmerman B, Egan ED, Lofgren, M, Xu X, Hesser A. и Blacklow SC. Структура человеческого POFUT1, его потребность в лиганд-независимой онкогенной передаче сигналов notch и функциональные эффекты мутаций Даулинга-Дегоса. Гликобиология, 2017, 27 (8): 777-786. DOI: 10,1093 / гликоб / cwx020.PMID: 28334865. PMC5881682.

Дуржинска И., Сюй Х, Адельмант Дж., Фикарро С.Б., Марто Дж. А., Слиз П., Улджон С. и Блэклоу СК. STK40 — это псевдокиназа, которая связывает убиквитинлигазу Е3 COP1. Структура 2017: 25, 287-294. DOI: 10.1016 / j.str.2016.12.008. PMID: 28089446. PMCID: PMC5299031.

Циммерман Б., Келли Б., Макмиллан, Б.Дж., Сигар, ТКМ, Дрор, Р.О., Круз, А.С. и Блэклоу, Южная Каролина.Кристаллическая структура полноразмерного тетраспанина человека обнаруживает холестерин-связывающий карман. Cell 2016; 167: 1041-1051. DOI: 10.1016 / j.cell.2016.09.056. PMCID: PMC5127602.

Макмиллан Б.Дж., Тиббе С., Чон Х., Драбек А.А., Кляйн Т. и Блэклоу СК. Электростатические взаимодействия между удлиненными мономерами управляют филаментацией Drosophila Shrub, белка ESCRT-III Metazoan.Cell Reports 2016; 16 (5): 1211-1217. DOI: 10.1016 / j.celrep.2016.06.093. PMCID: PMC4985235.

Бернаскони-Элиас П., Ху Т., Дженкинс Д., Файерстоун Б., Ганс С., Курт Е., Каподиечи П., Деплаз-Лаубер Дж., Петропулос К., Тиль П., Понсель Д., Хи Чой С., ЛеМотт П., Лондон А., Гётчкс М. , Nolin E, Jones MD, Slocum K, Kluk MJ, Weinstock DM, Christodoulou A, Weinberg O, Jaehrling J, Ettenberg SA, Buckler A, Blacklow SC, Aster JC, Fryer CJ.Характеристика активирующих мутаций NOTCh4 при остром лимфобластном лейкозе Т-клеток и противолейкемической активности антител, ингибирующих NOTCh4. Онкоген. 2016 9 мая. Doi: 10.1038 / onc.2016.133. PMID: 27157619. PMCID: PMC5102827.

ЛаРошель-младший, Фодор М., Сюй Х, Дуржинска И., Фан Л., Стэмс Т., Чан Х.М., ЛаМарш М.Дж., Чопра Р., Ван П., Фортин П.Д., Акер М.Г., Блэклоу СК.Структурные и функциональные последствия трех раковых мутаций онкогенной фосфатазы SHP2. Биохимия 2016; 55 (15): 2269-2277. DOI: 10.1021 / acs.biochem.5b01287. PMID: 27030275. PMCID: PMC4

1.

Uljon S, Xu X, Durzynska I, Stein S, Adelmant G, Marto JA, Pear WS, Blacklow SC. Структурная основа субстратной селективности E3-лигазы COP1.Структура. 2016; 24 (5): 687-96. DOI: 10.1016 / j.str.2016.03.002. PMID: 27041596. PMCID: PMC4856590

Meyer PA, Socias S, Key J, Ransey E, Tjon EC, Buschiazzo A, Lei M, Botka C, Withrow J, Neau D, Rajashankar K, Anderson KS, Baxter RH, Blacklow SC, Boggon TJ, Bonvin AM, Borek D, Brett TJ, Caflisch A, Chang CI, Chazin WJ, Corbett KD, Cosgrove MS, Crosson S, Dhe-Paganon S, Di Cera E, Drennan CL, Eck MJ, Eichman BF, Fan QR, Ferré-D’Amaré AR , Кристофер Фромм Дж, Гарсия К.С., Годе Р., Гонг П., Харрисон С.К., Хельдвейн Э., Цзя З., Кинан Р.Дж., Круз А.С., Квансакул М., Маклеллан Дж.С., Модис Й., Нам Й., Отвиновски З., Пай Е.Ф., Перейра П.Дж., Petosa C, Raman CS, Rapoport TA, Roll-Mecak A, Rosen MK, Rudenko G, Schlessinger J, Schwartz T.U, Shamoo Y, Sondermann H, Tao YJ, Tolia NH, Tsodikov OV, Westover KD, Wu H, Foster I, Фрейзер Дж. С., Майя Ф. Р., Гонен Т., Кирххаузен Т., Дидерикс К., Кросас М., Слиз П.Публикация данных с помощью сетки данных структурной биологии поддерживает анализ в реальном времени. Nat Commun. 2016; 7: 10882. DOI: 10,1038 / ncomms10882. PMID: 26947396. PMCID: PMC4786681.

Кнечел Б., Бхатт А., Пан Л., Педамаллу С.С., Северсон Е., Гутьеррес А., Дорфман Д.М., Куо ФК, Клюк М., Кунг А.Л., Цвейдлер-Маккей П., Мейерсон М., Блэклоу СК, ДеАнджело Д.Д., Астер Дж.С.Полный гематологический ответ острого лимфобластного лейкоза ранних предшественников Т-клеток на ингибитор γ-секретазы BMS-

4: генетические и эпигенетические данные в исключительном случае. Шпилька Cold Spring Harb Mol Case Stud. 2015; 1 (1): а000539. DOI: 10.1101 / mcs.a000539. PMID: 27148573. PMCID: PMC4850884.

X. Xu, S.H. Choi, T.Ху, К. Тиянонт, Р. Хабетс, А. Дж. Грут, М. Воойс, Дж. К. Астер, Р. Чопра, К. Фрайер и С. К. Блэклоу, «Анализ ауторегуляции Notch4 из структурных и функциональных исследований его отрицательной регулирующей области». ” Структура (Лондон, Англия: 1993) , т. 23, нет. 7. С. 1227–1235, июль 2015 г.

Вт.Р. Гордон, Б. Циммерман, Л. Хе, Л. Дж. Майлз, Дж. Хуанг, К. Тиянонт, Д. Дж. МакАртур, Дж. К. Астер, Н. Перримон, Дж. Дж. Лопаро и С. К. Блэклоу, «Механическая аллостерия: доказательства необходимости применения силы в протеолитическая активация Notch. », Dev Cell , vol. 33, нет. 6. С. 729–736, июнь 2015 г.

р.A. J. Habets, A. J. Groot, S. Yahyanejad, K. Tiyanont, S. C. Blacklow и M. Vooijs, «Человеческий NOTCh3 устойчив к лиганд-независимой активации металлопротеазой Adam17.», J Biol Chem , vol. 290, нет. 23, стр. 14705–14716, июнь 2015 г.

Б. Дж. Макмиллан, Б. Шнут, Н. Оленхард, Б. Циммерман, Л. Майлз, Н.Беглова, Т. Кляйн и С. К. Блэклоу, «Хвост из двух сайтов: двусторонний механизм распознавания лигандов notch лигазами e3 mind bomb», Mol Cell , vol. 57, нет. 5, стр. 912–924, март 2015 г.

Ю. Яширо-Отани, Х. Ван, К. Занг, К. Л. Арнетт, В. Бейлис, Ю. Хо, Б. Кнучел, К. Ланаузе, Л. Луис, К.С. Форсайт, С. Чен, Ю. Чанг, Дж. Шуг, Г. А. Блобель, С. А. Либхабер, Б. Е. Бернштейн, С. К. Блэклоу, XS Liu, JC Aster и WS Pear, «Активность энхансера дальнего действия определяет чувствительность Myc к ингибиторам Notch. in T-cell leukemia., Proceedings of the National Academy of Sciences , vol. 111, нет. 46, стр. E4946–53, ноябрь 2014 г.

М.Р. Маккеон, Д.Л. Шоу, Х. Фу, С. Лю, Х. Сю, Дж. Дж. Марино, Ю. Хуанг, Х. Чжан, Д.Л. Бакли, А. Кадам, З. Чжан, С. К. Блэклоу, Дж. Ци, В. Чжан и Дж. Брэднер, «Предвзятые многокомпонентные реакции для разработки новых ингибиторов бромодомена», J Med Chem , vol. 57, нет. 21, стр. 9019–9027, ноябрь 2014 г.

К.Л. Арнетт и С. К. Блэклоу, «Анализ ядерных комплексов передачи сигналов Notch с помощью анализа сдвига электрофоретической подвижности», Методы Mol Biol , том. 1187, стр. 231–245, 2014.

H. Wang, C. Zang, L. Taing, K. L. Arnett, Y. J. Wong, W. S. Pear, S. C. Blacklow, X. S. Liu и J. C. Aster, «Комплексы NOTCh2-RBPJ управляют экспрессией целевого гена посредством динамических взаимодействий с суперэнхансерами., ” Proceedings of the National Academy of Sciences , vol. 111, нет. 2. С. 705–710, январь 2014 г.

С. К. Блэклоу, «Улучшение зазубренной кромки», Structure (Лондон, Англия: 1993) , т. 21, нет. 12. С. 2100–2101, декабрь 2013 г.

К.Тиянонт, Т. Э. Уэльс, К. В. Зибель, Дж. Р. Энген и С. К. Блэклоу, «Взгляд на активацию и ингибирование Notch4, опосредованные антителами, направленными против его отрицательной регуляторной области», J Mol Biol , vol. 425, нет. 17, pp. 3192–3204, сентябрь 2013 г.

M. B. Andrawes, X. Xu, H. Liu, S. B. Ficarro, J.А. Марто, Дж. С. Астер и С. К. Блэклоу, «Внутренняя селективность Notch 1 для дельта-подобного 4 по сравнению с дельта-подобным 1.», J Biol Chem , vol. 288, нет. 35, стр. 25477–25489, август 2013 г.

Г. Роти, А. Карлтон, К. Н. Росс, М. Маркштейн, К. Пайчини, А. Х. Су, Н. Перримон, В. С. Пир, А. Л. Кунг, С. К. Блэклоу, Дж.C. Aster и K. Stegmaier, «Дополнительные геномные скрининги идентифицируют SERCA как терапевтическую мишень при мутированном раке NOTCh2», Cancer Cell , vol. 23, нет. 3. С. 390–405, март 2013.

.

Дж. К. Астер и С. К. Блэклоу, «Ориентация на путь Notch: извилины и повороты на пути к рациональной терапии., » J Clin Oncol , vol. 30, нет. 19, с. 2418–2420, июль 2012 г.

DJ O’Donovan, I. Stokes-Rees, Y. Nam, SC Blacklow, GF Schröder, AT Brunger и P. Sliz, «Сетевой веб-сервис для уточнения кристаллической структуры с низким разрешением», Acta Crystallogr Д Биол Кристаллогр , т.68, нет. 3. С. 261–267, март 2012 г.

Ш. Чой, Т. Е. Уэльс, Ю. Нам, Д. Д. О’Донован, П. Слиз, Дж. Р. Энген и С. К. Блэклоу, «Конформационная блокировка при совместной сборке комплексов транскрипции с надрезом»., Структура (Лондон, Англия: 1993) , т. 20, нет. 2, pp. 340–349, февраль 2012 г.

К.Germar, M. Dose, T. Konstantinou, J. Zhang, H. Wang, C. Lobry, KL Arnett, SC Blacklow, I. Aifantis, JC Aster и F. Gounari, «Т-клеточный фактор 1 является привратником для Спецификация Т-клеток в ответ на передачу сигналов Notch », Proceedings of the National Academy of Sciences , Nov. 2011.

Н. Дж. Ван, З.Санборн, К.Л. Арнетт, Л.Дж. Бейстон, В. Ляо, С.М. Проби, И.М. Ли, Э.А. Коллиссон, П.Б. Гордон, Л. Джаккула, С. Пеннипакер, Ю. Цзоу, М. Шарма, Дж. П. Норт, С. С. Вемула, Т. М. Мауро, И. М. Neuhaus, PE Leboit, JS Hur, K. Park, N. Huh, P.-Y. Квок, С. Т. Аррон, П. П. Массион, А. Э. Бейл, Д. Хаусслер, Дж. Э. Кливер, Дж. У. Грей, П. Т. Спеллман, А. П. Саут, Дж. К. Астер, С. К. Блэклоу и Р. Дж. Чо, «Мутации потери функции в рецепторах Notch в кожных и плоскоклеточный рак легкого., ” Proceedings of the National Academy of Sciences , vol. 108, нет. 43, стр. 17761–17766, октябрь 2011 г.

B. Zhao, J. Zou, H. Wang, E. Johannsen, C.-W. Пенг, Дж. Квакенбуш, Дж. К. Мар, К. С. Мортон, М. Л. Фридман, С. К. Блэклоу, Дж. С. Астер, Б. Э. Бернштейн и Э. Кифф, «Вирус Эпштейна-Барра использует внутренние программы транскрипции В-лимфоцитов для достижения бессмертного роста клеток., ” Proceedings of the National Academy of Sciences , vol. 108, нет. 36, стр. 14902–14907, сентябрь 2011 г.

Х. Ван, Дж. Цзоу, Б. Чжао, Э. Йоханнсен, Т. Эшворт, Х. Вонг, У. С. Пир, Дж. Шуг, С. К. Блэклоу, К. Л. Арнетт, Б. Е. Бернштейн, Э. Кифф и Дж. К. Астер, » Полногеномный анализ выявляет консервативные и дивергентные особенности связывания Notch2 / RBPJ в клетках Т-лимфобластного лейкоза человека и мыши., ” Proceedings of the National Academy of Sciences , Jul. 2011.

М. А. Кальдервуд, С. Ли, А. М. Холтхаус, С. К. Блэклоу, Э. Кифф и Э. Йоханнсен, «Ядерный белок 3C вируса Эпштейна-Барра связывается с N-концевым (NTD) и бета-трилистниковым доменами (BTD) RBP / CSL; только взаимодействие NTD важно для роста лимфобластоидных клеток., ” Virology , vol. 414, нет. 1. С. 19–25, май 2011.

K. Tiyanont, TE Wales, M. Aste-Amezaga, JC Aster, JR Engen и SC Blacklow, «Доказательства повышенного воздействия на сайт расщепления металлопротеиназы Notch2 при преобразовании в активированную конформацию», структура (Лондон, Англия) : 1993) , т.19, нет. 4. С. 546–554, апрель 2011 г.

J. C. Aster, S. C. Blacklow и W. S. Pear, «Передача сигналов Notch при Т-клеточном лимфобластном лейкозе / лимфоме и других гематологических злокачественных новообразованиях», J. Pathol. , т. 223, нет. 2. С. 262–273, январь 2011 г.

Дж.К. Астер, Н. Боднар, Л. Ксу, Ф. Карнелл, Дж. М. Милхолланд, И. Майярд, Г. Хистен, Ю. Нам, С. К. Блэклоу и В. С. Пир, «Вариация домена повторения Notch-анкирина влияет на лейкемогенез и трансактивацию мик. , ” PLoS ONE , vol. 6, вып. 10, стр. e25645, 2011.

Т. Д. Эшворт, В. С. Пир, М. Ю. Чианг, С.C. Blacklow, J. Mastio, L. Xu, M. Kelliher, P. Kastner, S. Chan и JC Aster, «Основанные на делеции механизмы активации Notch2 в T-ALL: ключевые роли для рекомбиназы RAG и консервативной внутренней сайт начала трансляции в Notch2 », Blood , vol. 116, нет. 25, pp. 5455–5464, декабрь 2010 г.

К. Кишан, В.Bailis, PH Dedhia, ME Vega, O. Shestova, L. Xu, K. Toscano, SN Uljon, SC Blacklow и WS Pear, «Трансформация посредством гомолога 2 Tribbles (Trib2) требует как домена киназы Trib2, так и связывания COP1. ” Кровь , т. 116, нет. 23, стр. 4948–4957, декабрь 2010 г.

Х. Лю, А. В. С. Чи, К. Л. Арнетт, М.Ю. Чан, Л. Сюй, О. Шестова, Х. Ван, Ю.-М. Ли, А. Бхандула, Дж. К. Астер, С. К. Блэклоу и В. С. Пир, «Димеризация Notch необходима для лейкемогенеза и развития Т-клеток», Genes Dev , vol. 24, вып. 21, стр. 2395–2407, ноябрь 2010 г.

К. Л. Арнетт, М. Хасс, Д. Г. Макартур, М. X. Г. Илаган, J.К. Астер, Р. Копан и С. К. Блэклоу, «Структурные и механистические исследования совместной сборки димерных транскрипционных комплексов Notch.», Nat Struct Mol Biol , vol. 17, нет. 11. С. 1312–1317, ноябрь 2010 г.

P.H.Dedhia, K. Keeshan, S. Uljon, L. Xu, M. E. Vega, O. Shestova, M. Zaks-Zilberman, C.Романи, С. К. Блэклоу и У. С. Пир, «Различная способность членов семьи Трибблз способствовать деградации C / EBPalpha и вызывать острый миелогенный лейкоз», Blood , vol. 116, нет. 8, pp. 1321–1328, август 2010 г.

Р. А. Ковалл и С. К. Блэклоу, «Механистическое понимание передачи сигналов рецептора Notch из структурных и биохимических исследований., ” Curr Top Dev Biol , vol. 92, стр. 31–71, 2010.

M. Aste-Amezaga, N. Zhang, JE Lineberger, BA Arnold, TJ Toner, M. Gu, L. Huang, S. Vitelli, KT Vo, P. Haytko, JZ Zhao, F. Baleydier, S. L ‘ Heureux, H. Wang, WR Gordon, E. Thoryk, MB Andrawes, K. Tiyanont, K. Stegmaier, G. Roti, K.Н. Росс, LL Franlin, H. Wang, F. Wang, M. Chastain, AJ Bett, LP Audoly, JC Aster, SC Blacklow и HE Huber, «Характеристика антител Notch2, которые ингибируют передачу сигналов как нормальных, так и мутировавших рецепторов Notch2. ., » PLoS ONE , vol. 5, вып. 2, стр. e9094, 2010.

К. Дель Бьянко, А.Веденко, С. Х. Чой, М. Ф. Бергер, Л. Шокри, М. Л. Булик и С. К. Блэклоу, «Комплексообразование Notch и MAML-1 не изменяет детектируемой специфичности связывания ДНК фактора транскрипции CSL», PLoS ONE , vol. 5, вып. 11, стр. e15034, 2010 год

Р. Э. Мёллеринг, М. Корнехо, Т. Н. Дэвис, К. Дель Бьянко, Дж.К. Астер, С. К. Блэклоу, А. Л. Кунг, Д. Г. Гиллиланд, Г. Л. Вердин и Дж. Э. Браднер, «Прямое ингибирование комплекса факторов транскрипции NOTCH», Nature , vol. 462, нет. 7270, с. 182–188, ноябрь 2009 г.

Ю. Яширо-Отани, Ю. Хе, Т. Отани, М. Э. Джонс, О. Шестова, Л. Сюй, Т. К. Фанг, М. Ю. Чан, А.М. Интлекофер, С. К. Блэклоу, Ю. Чжуанг и В. С. Пир, «Передача сигналов пре-TCR инактивирует транскрипцию Notch2 за счет противодействия E2A.», Genes Dev , vol. 23, нет. 14. С. 1665–1676, июль 2009 г.

W. R. Gordon, M. Roy, D. Vardar-Ulu, M. Garfinkel, M. R. Mansour, J. C. Aster и S. C. Blacklow, «Структура Notch2-негативной регуляторной области: значение для нормальной активации и патогенной передачи сигналов при T-ALL., ” Кровь , т. 113, нет. 18, pp. 4381–4390, Apr. 2009.

WR Gordon, D. Vardar-Ulu, S. L’Heureux, T. Ashworth, MJ Malecki, C. Sanchez-Irizarry, DG McArthur, G. Histen, JL Mitchell, JC Aster и SC Blacklow, «Эффекты S1 расщепление на структуру, поверхностный экспорт и сигнальную активность Notch2 и Notch3 человека., ” PLoS ONE , vol. 4, вып. 8, стр. e6613, 2009.

W. R. Gordon, K. L. Arnett и S. C. Blacklow, «Молекулярная логика передачи сигналов Notch — структурная и биохимическая перспектива», J Cell Sci , vol. 121, нет. 19, стр. 3109–3119, октябрь 2008 г.,

К.Ли, Ю. Ли, В. Ву, В. Р. Гордон, Д. В. Чанг, М. Лу, С. Скоггин, Т. Фу, Л. Вьен, Г. Хистен, Дж. Чжэн, Р. Мартин-Холлистер, Т. Дуенсинг, С. Сингх, С. К. Блэклоу, З. Яо, Дж. К. Астер, Б.-Б. С. Чжоу, «Модуляция передачи сигналов Notch с помощью антител, специфичных для внеклеточной негативной регуляторной области NOTCh4.», J Biol Chem , vol. 283, нет. 12. С. 8046–8054, март 2008 г.

К.Эстрада, К. Фишер и С. К. Блэклоу, «Разворачивание спирального пучка RAP-D3 способствует диссоциации комплексов RAP-рецептор»., Biochemistry , vol. 47, нет. 6. С. 1532–1539, февраль 2008 г.

К. Дель Бьянко, Дж. К. Астер и С. К. Блэклоу, «Мутационные и энергетические исследования транскрипционных комплексов Notch 1., ” J Mol Biol , vol. 376, нет. 1, стр. 131–140, февраль 2008 г.

Дж. К. Астер, В. С. Пир и С. К. Блэклоу, «Передача сигналов Notch при лейкемии», Annu Rev Pathol , vol. 3. С. 587–613, 2008.

.

С.К. Блэклоу, «Универсальность в распознавании лигандов белками семейства рецепторов ЛПНП: достижения и границы», Curr Opin Struct Biol , vol. 17, нет. 4, стр. 419–426, август 2007 г.

T. C. Fang, Y. Yashiro-Ohtani, C. Del Bianco, D. M. Knoblock, S. C. Blacklow и W. S. Pear, «Notch напрямую регулирует экспрессию Gata3 во время дифференцировки T-хелперов 2»., ” Иммунитет , т. 27, нет. 1. С. 100–110, июл. 2007 г.

В. Кодури и С. К. Блэклоу, «Потребность в нативно неструктурированных областях кандидат 2 развития мезодермы для стимулирования созревания белка 6, связанного с рецептором липопротеинов низкой плотности», Biochemistry , vol. 46, нет. 22, pp. 6570–6577, июн.2007.

W. R. Gordon, D. Vardar-Ulu, G. Histen, C. Sanchez-Irizarry, J. C. Aster и S. C. Blacklow, «Структурные основы аутоингибирования Notch.», Nat Struct Mol Biol , vol. 14, вып. 4. pp. 295–300, Apr. 2007.

.

Ю.Нам, П. Слиз, В. С. Пир, Дж. К. Астер и С. К. Блэклоу, «Совместная сборка Notch-комплексов более высокого порядка действует как переключатель для индукции транскрипции», Proc Natl Acad Sci USA , vol. 104, нет. 7, pp. 2103–2108, февраль 2007 г.

А. П. Венг, Дж. М. Миллхолланд, Ю. Яширо-Отани, М. Л. Арканджели, А.Лау, К. Вай, К. Дель Бьянко, К. Г. Родригес, Х. Сай, Дж. Тобиас, Ю. Ли, М. С. Вулф, К. Шахаф, Д. Фелшер, С. К. Блэклоу, В. С. Пир и Дж. К. Астер, «c- Myc является важной прямой мишенью Notch2 при остром лимфобластном лейкозе / лимфоме Т-клеток », Genes Dev , vol. 20, нет. 15, стр. 2096–2109, август 2006 г.

М.Y. Chiang, ML Xu, G. Histen, O. Shestova, M. Roy, Y. Nam, SC Blacklow, DB Sacks, WS Pear и JC Aster, «Идентификация консервативной негативной регуляторной последовательности, которая влияет на лейкемогенную активность NOTCh2., Mol Cell Biol , vol. 26, вып. 16, pp. 6261–6271, август 2006 г.

Д.Ли, Дж. Д. Уолш, И. Михайленко, П. Ю, М. Миглиорини, Ю. Ву, С. Крюгер, Дж. Э. Кертис, Б. Харрис, С. Локетт, С. К. Блэклоу, Д. К. Стрикленд, Ю.-Х. Ван, «RAP использует гистидиновый переключатель для регулирования своего взаимодействия с LRP в ER и Golgi.», Mol Cell , vol. 22, нет. 3. pp. 423–430, May 2006.

.

С.Фишер, Н. Беглова и С. К. Блэклоу, «Структура комплекса LDLR-RAP показывает общий способ распознавания лиганда рецепторами липопротеинов», Mol Cell , vol. 22, нет. 2, pp. 277–283, Apr. 2006.

Ю. Нам, П. Слиз, Л. Сонг, Дж. К. Астер и С. К. Блэклоу, «Структурная основа кооперативности в рекрутировании коактиваторов MAML в комплексы транскрипции Notch., ” Cell , vol. 124, вып. 5. С. 973–983, март 2006 г.

 [pdf]

MJ Malecki, C. Sanchez-Irizarry, JL Mitchell, G. Histen, ML Xu, JC Aster и SC Blacklow, «Связанные с лейкемией мутации в домене гетеродимеризации NOTCh2 делятся по крайней мере на два различных механистических класса», Mol Cell Biol , т.26, вып. 12. С. 4642–4651, июнь 2006 г.

 [pdf]

К. Санчес-Ирисарри, А. К. Карпентер, А. П. Вен, В. С. Груш, Дж. К. Астер и С. К. Блэклоу, «Гетеродимеризация Notch-субъединицы и предотвращение лиганд-независимой протеолитической активации, соответственно, зависят от нового домена и повторов LNR», Mol Cell Biol , т.24, вып. 21, pp. 9265–9273, Oct. 2004.

 [pdf]

Активирующие мутации NOTCh2 при остром лимфобластном лейкозе Т-клеток человека.
Вен А. П., Феррандо А. А., Ли В., Моррис Дж. П., Сильверман Л. Б., Санчес-Иризарри С., Блэклоу С. К., Лук Т. и Астер Дж. Наука. 2004 г. 8 октября; 306 (5694): 269-71.

 [pdf]

Структура ЯМР прототипа модуля LNR от человека Notch2.
Vardar D, North CL, Sanchez-Irizarry C, Aster JC и Blacklow SC. Биохимия 2003; 42: 7061-7067.

 [pdf]

S.C. Структурные требования для сборки комплекса активации транскрипции CSL / внутриклеточной Notch2 / Mastermind-like 1.
Nam Y, Weng AP, Aster JC и Blacklow, J. Biol. Chem. 2003, 278: 21232-21239.

 [pdf]

Подавление роста клеток острого лимфобластного лейкоза Pre-T путем ингибирования передачи сигналов Notch.
Weng AP, Nam Y, Wolfe MS, Pear WS, Griffin JD, Blacklow SC и Aster JC. Mol Cell Biol 2003; 23: 655-664.

 [pdf]

Передача сигналов Notch как терапевтическая мишень.
Nam Y, Aster JC, Blacklow SC. Curr Opin Chem Biol. 2002 августа; 6 (4): 501-9. Рассмотрение.

 [pdf]

MAM1, человеческий гомолог Drosophila Mastermind, является коактиватором транскрипции для рецепторов notch.
Wu L, Aster JC, Blacklow SC, Lake R, Artavanis-Tsakonas S. и Griffin JD. Nature Genetics 2000; 26: 484-489.

 [pdf]

Истощение запасов кальция диссоциирует и активирует гетеродимерные рецепторы notch.
Rand MD, Grimm LM, Artavanis-Tsakonas S, Patriub V, Blacklow SC, Sklar J, Aster JC. Mol Cell Biol. 2000 Март; 20 (5): 1825-35

 [pdf]

Складывание и структурная целостность первого модуля LIN12 Notch2 человека зависят от кальция.
Aster JC, Simms WB, Zavala-Ruiz Z, Patriub V, North CL и Blacklow SC. Биохимия 1999; 38: 4736-42.

 [pdf]

Специфичность аминокислотной основы машины для трансляции Escherichia coli.
Tan Z, Forster AC, Blacklow SC, Cornish VW. J. Am Chem Soc. 2004; 126: 12752-12753.

Дисплей чистого перевода.
Форстер, AC, Корниш, Вирджиния, Блэклоу, Южная Каролина. Аналитическая биохимия 2004; 333 (2): 358-64.

 [pdf]

Программирование синтезов пептидомиметиков путем трансляции генетических кодов, разработанных de novo.
Форстер, А., Тан, З., Налам, М.Н., Лин, Х., Ку, Х., Корниш, В.В., и Блэклоу, С.С. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2003; 100 (11): 6353-6357.

 [pdf]

Упрощенное восстановление мРНК-направленного синтеза пептидов: активность последовательности энхансера эпсилона и неприродной аминокислоты.
Forster, A, Weissbach, H, and Blacklow, SC. Аналитическая биохимия 2001; 297: 60-70.

 [pdf]

Структура богатого цистеином модуля показывает точку опоры для перегруппировки интегрина при активации.
Беглова, Н., Блэклоу, Южная Каролина, Такаги, Дж., Спрингер, Т.А. Биология структуры природы 2002; 9: 282-287.

 [pdf]

Определение EGF-подобных, тесно взаимодействующих модулей, которые несут активационные эпитопы в субъединицах интегрина бета.
Такаги, Дж., Беглова, Н., Яламанчили, П., Блэклоу, С.К., и Спрингер, Т.А. PNAS 2001; 98: 11175-11180.

 [pdf]

SCAN-домен ZNF174 является димером.
Stone JR, Maki JL, Blacklow SC и Collins T. J. Biol Chem 2002; 277: 5448-5452.

 [pdf]

Роль воды в каталитической эффективности триозофосфатизомеразы.
Zhang Z, Komives EA, Sugio S, Blacklow SC, Narayana N, Xuong NH, Stock AM, Petsko GA, and Ringe D. Biochemistry 1999; 38: 4389-97.

 [pdf]

Блок SCAN, связанный с цинковыми пальцами, представляет собой домен олигомеризации.
Williams, AJ, Blacklow, SC, и Collins, T. Mol Cell Biol 1999; 19: 8526-8535.

 [pdf]

[ДИАГРАММА] Схема носовых желез ПОЛНАЯ версия Носовые железы HD качества

Скачать бесплатно Diagram Of Nasal Glands 1080p, 1920 x 1080 FHD, разрешение Full HD, 2K, 2048 x 1080, 2000,1440p, 2560 x 1440, QHD, разрешение Quad HD, 1440p, HD ready, 4K, 2160p, 3840 x 216, UHD, разрешение Ultra HD, 4000 пикселей, 8K, 4320p, 7680 x 4320, формат файла HD Quality, JPEG, JPEG XR, JPEG 2000, JPEG XS, PNG, WebP, HEIF, PDF, EPUB, MOBI Квартира (1.85: 1) / 3996×2160 Прицел (2.39: 1) / 4096×1716 QuadHD (16: 9) / 3840×2160 Полный контейнер / 4096×2160 Плоский (1,85: 1) / 1998×1080 Прицел (2,39: 1) / 2048×858 QuadHD (16: 9) / 1920×1080 Полный контейнер / 2048×1080 1,33: 1 (4: 3) / 5120×3840 1,66: 1 (5: 3) / 5120×3072 1,77: 1 (16: 9) / 5120×2880 1,85: 1 / 5120×2768 1,9: 1 (эпический полнокадровый) / 5120×2700 2: 1 / 5120×2560 2,37: 1 (КРАСНЫЙ, ширина 5k) / 5120×2160 2,39: 1 (далее 2,40) / 5120×2142 2,44 / 5120×2098 2,35: 1 / 5120×2179 1,33: 1 (4: 3) / 4096×3072 1.66: 1 (5: 3) / 4096×2458 1,77: 1 (16: 9) / 4096 x 2304 1,85: 1 / 4096×2214 1,9: 1 (исходный 4k красный) / 4096×2160 2: 1 / 4096×2048 2,35: 1 / 4096×1679 2,37: 1 (КРАСНЫЙ, широкий) / 4096×1743 2,39: 1 (далее 2,40) / 4096×1728 2,44 / 4096×1714 1,33: 1 (4: 3) / 3840 x 2880 1,66: 1 (5: 3) / 3840 x 2304 1,77: 1 (16: 9) / 3840 x 2160 1,85: 1/3840 x 2076 2: 1 / 3840×1920 2,35: 1 / 3840×1634 2,37: 1 (КРАСНЫЙ, широкий) / 3840×1620 2,39: 1 (далее 2,40) / 3840×1607 2,44 / 3840×1574 1,33: 1 (4: 3) / 2048×1536 1.66: 1 (5: 3) / 2048×1229 1,77: 1 (16: 9) / 2048×1152 1,85: 1 / 2048×1107 2: 1 / 2048×1024 2,35: 1 / 2048×871 2,37: 1 (КРАСНЫЙ, широкий) / 2048×864 2,39: 1 (далее 2,40) / 2048×858 2,44 / 2048×839 1,66: 1 (5: 3) / 1920 x 1152 1,77: 1 (16: 9) / 1920×1080 1,85: 1 / 1920×1038 2: 1/1920 x 960 2,35: 1/1920 x 817 2,37: 1 (КРАСНЫЙ, широкий) / 1920 x 810 2,39: 1 (далее 2,40) / 1920 x 803 2,40: 1 (Blu-Ray) / 1920 x 800 2,44 / 1920×787 1,33: 1 (4: 3) / 1920 x 1440
Существуют схемы носовых желез как минимум следующих типов негара: Подобная диаграмме [негара], которая берет набор элементов и взаимосвязей с обутыми и не обутыми и выражает их, давая каждому элементу двухмерное положение, в то время как отношения выражаются как связи между элементами или совпадения, относящиеся к образцам предметов. таких техник: древовидная диаграмма Диаграмма сети блок-схема Диаграмма Венна экзистенциальный граф Диаграммы на основе графиков отображают взаимосвязь между двумя переменными, которые принимают либо дискретные, либо, возможно, непрерывные диапазоны значений. Примеры: гистограмма гистограмма круговая диаграмма график функции диаграмма рассеяния Схемы и др. Схемы, эл.грамм., диаграмма расписания поездов в разобранном виде карта плотности населения Пионерская доска Трехмерная диаграмма Некоторые из этих типов диаграмм обычно создаются с помощью программного обеспечения для создания диаграмм, такого как Visio и Gliffy. Существуют тысячи диаграммных техник. Далее следуют другие примеры. Диаграммы также могут быть классифицированы в соответствии с использованием или назначением, например, пояснительные и / или как диаграммы.
А Диаграмма действий, используемая в UML 6/9 и SysML B Диаграмма Бахмана Буч используется в программной инженерии Блок-схема Схема определения блока BDD, используемая в SysML C Диаграмма Кэрролла Картограмма Каталитический цикл Химическое уравнение Фигурная стрелочная диаграмма Диаграммы теории категорий Причинно-следственная диаграмма Схема хорды Принципиальная электрическая схема Диаграмма классов из UML 1/9 Диаграмма взаимодействия из UML 2.0 Схема связи из UML 2.0 Коммутативная диаграмма Диаграмма сравнения Схема компонентов из UML 3/9 Схема составной структуры из UML 2.0 Диаграмма связей Диаграмма созвездия Диаграмма контекста Схема потока управления Контурная диаграмма Диаграмма Кордье Кросс-функциональная блок-схема D Схема модели данных Схема потока данных Схема структуры данных Дендрограмма Диаграмма зависимости Схема развертывания из UML 9/9 Точечная и крестовая диаграмма Двойная пузырьковая карта, используемая в образовании Дракон-карта E Диаграмма сущность-связь ERD Цепочка процессов, управляемая событиями Диаграмма Эйлера Глазковая диаграмма — диаграмма принятого телекоммуникационного сигнала. Экспресс-Г Расширенная функциональная блок-схема EFFBD F Семейное древо Диаграмма Фейнмана Блок-схема Схема технологического процесса Схема Диаграмма слияния Схема свободного тела грамм Диаграмма Ганта показывает время выполнения задач или действий, используемых в управлении проектами. Диаграмма Гротриана Диаграмма Гудмана показывает пример данных об усталости: для лопастей ветряной турбины. ЧАС Диаграмма Хассе Диаграмма HIPO я Внутренняя блок-схема IBD, используемая в SysML IDEF0 IDEF1 отношения сущностей Обзорная диаграмма взаимодействия из UML Диаграмма Исикавы J Диаграмма Джексона K Карта Карно Кинематическая диаграмма L Лестничная диаграмма Линия баланса Диаграмма грамматики ссылок M Мартин ERD Таблица последовательности сообщений Интеллектуальная карта, используемая для обучения, мозгового штурма, памяти, визуального мышления и решения проблем Диаграмма пространства-времени Минковского Молекулярная орбитальная диаграмма N N2 Диаграмма Насси Шнейдермана или структурограмма представление для структурного программирования Номограмма Диаграмма сети О Диаграмма объектов из UML 2/9 Органиграмма Луковая диаграмма, также известная как «составная диаграмма Венна». п Диаграмма пакетов из UML 4/9 и SysML Параметрическая диаграмма из SysML ПЕРТ Сеть Петри показывает структуру распределенной системы в виде ориентированного двудольного графа с аннотациями Филогенетическое древо — представляет собой филогенетические эволюционные отношения между группами организмов. Схема трубопроводов и КИПиА Фазовая диаграмма, используемая для представления информации о твердом / жидком / газовом состоянии Схема завода Диаграмма давления и объема, используемая для анализа двигателей Диаграмма Пурбе Схема технологического процесса или PFD, используемая в химическом машиностроении Схема структуры программы р Радарная диаграмма Радиальная диаграмма Схема требований, используемая в SysML Богатое изображение R-диаграмма Схема маршрутизации S Диаграмма Санки представляет потоки материалов, энергии или затрат со стрелками, пропорциональными количеству в технологической сети.Диаграмма предложений представляет грамматическую структуру предложения естественного языка. Диаграмма последовательности из UML 8/9 и SysML Язык спецификации и описания диаграмм SDL / GR. SDL — это формальный язык, используемый в информатике. Диаграмма Смита График паука Схема распыления Методология анализа и проектирования структурированных систем SSADM, используемая в разработке программного обеспечения Карта звездного неба / небесная сфера Диаграммы состояний используются для конечных автоматов в программной инженерии из UML 7/9. Дорожка для плавания Синтаксическая диаграмма, используемая в разработке программного обеспечения для представления контекстно-свободной грамматики Системная биология Графическая нотация — графическая нотация, используемая в диаграммах биохимических и клеточных процессов, изучаемых в Системной биологии. Диаграмма контекста системы Структура системы Систематическое планирование планировки Т Временная диаграмма: цифровая временная диаграмма Временная диаграмма: UML 2.0 Диаграмма TQM Древовидная карта U Диаграмма UML Единый язык моделирования, используемый в разработке программного обеспечения Диаграмма вариантов использования из UML 5/9 и SysML V Значение карты потока Диаграмма Венна Диаграмма Вороного W Warnier-Orr Диаграмма Вильямса Y Йордон-Коад см. Эдвард Йордон, используемый в разработке программного обеспечения.

Загрузки Схема предложения назальных желез Office Depot office 365 вход в систему office 365 office ally office officemax offset offerup лос-анджелес офисное кресло Off-white office depot.com официальный офис депо бизнес канцелярские принадлежности предлагают веб-сайт офисная мебель офис онлайн офлайн игры офис 365 знак в офисе макс / депо мышей и мужчин offroad outlaws офис бывшего президента предложение сан-диего


Профиль Роми Юн | Стэнфордские профили

Применение эхогенной технологии для катетеров, используемых в блоках непрерывных периферических нервов под контролем УЗИ ЖУРНАЛ УЛЬТРАЗВУКА В МЕДИЦИНЕ Мариано, Э.Р., Юн, Р. Д., Ким, Т. Э., Карвалью, Б. 2014; 33 (5): 905-911
Аннотация

Существуют ограниченные данные относительно эхогенности периневральных катетеров, но визуализация имеет решающее значение для обеспечения точного размещения и эффективности последующей инфузии местного анестетика. Целью данного исследования было определение сравнительной эхогенности различных катетеров для регионарной анестезии. На модели свиней и крупного рогатого скота in vitro мы сравнили эхогенные качества 3 коммерчески доступных катетеров для регионарной анестезии и 1 катетера, находящегося в стадии разработки, для оптимизации эхогенности.Результаты включали рейтинг визуальной эхогенности, качество изображения и время сканирования, оцененные двумя слепыми исследователями. Экспериментальный катетер оказался более эхогенным, чем 2 из 3 компараторов.

Просмотреть подробности для DOI 10.7863 / ultra.33.5.905

Просмотр сведений о Web of Science ID 000335620700018

Просмотреть сведения о PubMedID 24764346

Радиочастотное лечение гипертрофии миндалин с контролем температуры для уменьшения обструкции верхних дыхательных путей у педиатрических пациентов. Архив отоларингологии — хирургия головы и шеи Котичиа, Дж. М., Юн, Р. Д., Нельсон, Л., Кёмпель, Дж. 2006; 132 (4): 425–30
Аннотация

Определить, являются ли уменьшение миндалин и аденоидэктомия с контролируемой температурой (TCRF) и аденоидэктомия (TCRF & A) и традиционная тонзиллэктомия и аденоидэктомия (T&A) статистически схожими по результатам, и сравнить заболеваемость между TCRF & A и традиционным T&A. Рандомизированное контрольное испытание.Детская больница третичного уровня. В исследование вошли 23 пациента в возрасте от 2,6 до 12,5 лет с симптомами обструктивного апноэ во сне, гипертрофическими миндалинами без других участков обструкции верхних дыхательных путей, за исключением гипертрофических аденоидов, и индексом массы тела (рассчитанным как масса тела (килограммы, разделенные на квадрат высоты в метрах) менее 30. Уменьшение миндалин с контролем температуры (среднее +/- SD, 12,6 +/- 1,5 абляции на пациента и 994,68 +/- 91,88 Дж на введение) и аденоидэктомия или традиционная bovie T&A.Первичные результаты — индекс респираторного дистресс-синдрома и уменьшение общего объема. Вторичные результаты включают послеоперационную боль, дневную сонливость, проблемы с речью и глотанием, вес и диету, употребление наркотиков и аналоговую шкалу храпа. Разница в индексе респираторного дистресса для TCRF & A составила 5,63 против 6,56 для стандартных T&A. В 1 послеоперационный день из 13 пациентов, перенесших TCRF & A, 0 сообщили о сильной боли, 11 (85%) — от легкой до умеренной боли, а 2 (15%) — без боли. Из 10 пациентов, перенесших стандартную терапию и терапию, у 1 (10%) была сильная боль, а у 9 (90%) — легкая или умеренная боль.К 1-й неделе после операции все пациенты с TCRF & A испытали легкую боль или ее отсутствие, тогда как у 1 (10%) пациентов стандартной T&A боль все еще была умеренной. Средние показатели храпа по визуальному аналогу (0-10) через 4 недели после операции были меньше 1 для обеих групп. Среднее +/- SD потеря веса на 1-й неделе после операции для пациентов с уменьшением миндалин с TCRF составила 1,0 +/- 3,5 фунта (0,45 +/- 1,58 кг) по сравнению с 4,6 +/- 3,9 фунта (2,07 +/- 1,76 кг) для стандартного T&A. пациенты. Возвращение к нормальной диете на 1-й неделе после операции произошло у 11 пациентов с TCRF & A (85%) и 0 пациентов со стандартным T&A.Индексы респираторного дистресса были аналогичными для пациентов с TCRF & A и пациентов со стандартным T&A. Кроме того, были аналогичные аналоговые весы от храпа, уменьшение боли и потеря веса.

Подробнее о DOI 10.1001 / archotol.132.4.425

Просмотреть сведения о PubMedID 16618912

Возрастные, локальные и временные различия в педиатрических глубоких абсцессах шеи. Архив отоларингологии — хирургия головы и шеи Котичиа, Дж.М., Гетник, Г. С., Юн, Р. Д., Арнольд, Дж. Э. 2004; 130 (2): 201–7
Аннотация

Для уточнения представлений, микроорганизмов и локализации глубоких абсцессов шеи у детей. Ретроспективный обзор. Третичная детская больница. Исследуемая популяция включала 169 пациентов моложе 19 лет, которым в период с 1989 по 1999 год проводилось хирургическое лечение глубоких абсцессов шеи. Разрешение абсцесса. Масса шеи (91%), лихорадка (86%), аденопатия шейки матки (83%), недостаточное пероральное употребление. (66%) и ригидность шеи (59%) были обычными во всех возрастах.Пациенты младше 4 лет по сравнению с пациентами 4 лет и старше имели возбуждение (50% против 14%), кашель (35% против 14%), слюнотечение (27% против 12%), вялость (46% против 33%). ), аномалии ротоглотки (45% против 60%), респираторный дистресс (5% против 2%), ретракции (5% против 2%), ринорея (53% против 15%), стридор (4% против 2%) и тризм (14% против 53%). Дети младше 1 года были инфицированы золотистым стафилококком (79%) по сравнению со стрептококком группы А (6%). Дети в возрасте 1 года и старше были инфицированы стрептококком группы А (29%) по сравнению с S aureus (16%).Заглоточные или парафарингеальные области были поражены у детей от 1 года и старше (49%) по сравнению с младше 1 года (21%). Передний или задний треугольники, а также поднижнечелюстные или субментальные области были задействованы у 39% и 36% детей младше 1 года соответственно против 30% и 23% соответственно у детей 1 года и старше. Заглоточные и парафарингеальные абсцессы выявили стрептококки группы А (34%) по сравнению с S aureus (11%). Абсцессы переднего и заднего треугольников показали наличие S aureus (35%) по сравнению со стрептококком группы A (19%), как и подчелюстные и субментальные абсцессы (42% против 19%).Абсцессы у детей младше 1 года поражают передние или задние треугольники, подчелюстные или субментальные области, что дает S aureus. Абсцессы у детей от 1 года и старше поражали заглоточные или парафарингеальные области, давая стрептококки группы А.

Подробнее о DOI 10.1001 / archotol.130.2.201

Просмотреть сведения о PubMedID 14967751

Комплекс mSin3A / гистондеацетилаза 2 и PRMT5, содержащий Brg1, участвует в репрессии транскрипции гена-мишени Myc cad. Молекулярная и клеточная биология Пал, С., Юн, Р., Датта, А., Лакомис, Л., Эрдджумент-Бромаж, Х., Кумар, Дж., Темпст, П., Сиф, С. 2003; 23 (21): 7475–87
Аннотация

Роль комплексов hSWI / SNF в активации транскрипции хорошо изучена; однако мало что известно об их функции в репрессии транскрипции. Ранее мы показали, что субъединицы корепрессорного комплекса mSin3A / гистондеацетилаза 2 (HDAC2) соочищаются с комплексами hSWI / SNF.Здесь мы показываем, что аргинин-специфическая метилтрансфераза типа II PRMT5, которая участвует в репрессии циклина E, может быть обнаружена в ассоциации с комплексами hSWI / SNF на основе Brg1 и hBrm. Мы также показали, что hSWI / SNF-ассоциированный PRMT5 может метилировать гипоацетилированные гистоны h4 и h5 более эффективно, чем гиперацетилированные гистоны h4 и h5. Исследования белок-белкового взаимодействия показывают, что PRMT5 и mSin3A взаимодействуют с теми же субъединицами hSWI / SNF, что и субъединицы c-Myc. Эти наблюдения побудили нас изучить профиль экспрессии генов-мишеней c-Myc, карбамоил-фосфатсинтазы-аспартата, карбамоилтрансферазы-дигидрооротазы (cad) и нуклеолина (nuc).Мы обнаружили, что репрессия cad изменяется в клетках, которые экспрессируют неактивный Brg1, и в клетках, обработанных депсипептидом ингибитора HDAC. Используя анализы иммунопреципитации хроматина, мы обнаружили, что Brg1, mSin3A, HDAC2 и PRMT5 непосредственно рекрутируются на промотор cad. Эти результаты предполагают, что комплексы hSWI / SNF, благодаря их способности взаимодействовать с активаторными и репрессорными белками, контролируют экспрессию генов, участвующих в росте и пролиферации клеток.

Подробнее о DOI 10.1128 / mcb.23.21.7475-7487.2003

Просмотреть сведения о PubMedID 14559996

Просмотр сведений о PubMedCentralID PMC207647

Добавить: pN3-Sp1FL Цитаты

Sh3B1beta взаимодействует с STAT3 и усиливает экспрессию гена, индуцированную фактором роста 1 фибробластов, во время дифференцировки нейронов. Чанг Й.Дж., Чен К.В., Чен С.Дж., Линь М.Х., Сунь Й.Дж., Ли Дж.Л., Чиу И.М., Чен Л. Mol Cell Biol. 2014 Март; 34 (6): 1003-19. DOI: 10.1128 / MCB.00940-13. Epub 2014 6 января PubMed
Репрессия транскрипции индуцируемого гипоксией фактора-1 (HIF-1) протеином аргининметилтрансферазой PRMT1. Лафлер В.Н., Ричард С., Ричард Д.Е. Mol Biol Cell. 2014 Март; 25 (6): 925-35. DOI: 10.1091 / mbc.E13-07-0423. Epub 2014 22 января PubMed
Экспрессия ксилозилтрансферазы-1 устойчива к ингибированию воспалительными цитокинами фактора некроза опухоли альфа и IL-1beta в клетках пульпозного ядра: новая регуляция AP-1, Sp1 и Sp3. Йе В, Чжоу Дж, Маркова Д.З., Тиан Й., Ли Дж., Андерсон Д.Г., Шапиро И.М., Рисбуд М.В. Am J Pathol. 2015 Февраль; 185 (2): 485-95. DOI: 10.1016 / j.ajpath.2014.09.021. Epub 2014 2 декабря PubMed
Физиологическая экспрессия TLR5 в кишечнике регулируется дифференциальным связыванием ДНК Sp1 / Sp3 посредством одновременного дефосфорилирования Sp1 и фосфорилирования Sp3 двумя разными изоформами PKC. Тхакур Б.К., Дасгупта Н., Та А., Дас С. Nucleic Acids Res. 2016 8 июля; 44 (12): 5658-72. DOI: 10.1093 / nar / gkw189. Epub, 2016, 7 апреля, PubMed
Регулирование дезинтегринов и металлопротеиназы с тромбоспондиновыми мотивами 7 во время воспаления в клетках пульпозного ядра (NP): роль передачи сигналов AP-1, Sp1 и NF-kappaB. Ван Х, Ли Ц., Лян А, Пэн Й, Сунь Дж, Хуан Д., Сюй К., Е В. Inflamm Res. 2016 декабрь; 65 (12): 951-962. Epub 11 августа 2016 г. PubMed
Митрамицин ингибирует эпителиально-мезенхимальный переход и инвазию путем подавления SP1 и SNAI1 в аденоидной кистозной карциноме слюны. Ли Дж, Гао Х, Мэн Л., Инь Л. Tumor Biol. 2017 июн; 39 (6): 1010428317708697. DOI: 10.1177 / 1010428317708697. PubMed
Фосфорилирование Sp1 с помощью ATM подавляет BER и способствует элиминации клеток в ответ на стойкое повреждение ДНК. Fletcher SC, Grou CP, Legrand AJ, Chen X, Soderstrom K, Poletto M, Dianov GL. Nucleic Acids Res. 2018 28 февраля; 46 (4): 1834-1846. DOI: 10.1093 / nar / gkx1291. PubMed
Специфический белок 1, c-Abl и ERK1 / 2 образуют регуляторную петлю. Лонг Дж, Ляо Дж, Ван И, Тан ДД. J Cell Sci. 2019 2 января; 132 (1). pii: jcs.222380. DOI: 10.1242 / jcs.222380. PubMed
Прямое ингибирование пути TLR4 / MyD88 генипозидом подавляет HIF-1альфа-независимую экспрессию VEGF и ангиогенез в гепатоцеллюлярной карциноме. Чжан Ч., Ван Н., Тан Х.Й., Го В., Чен Ф., Чжун З., Ман К., Цао С.В., Лао Л., Фэн Ю. Br J Pharmacol. 2020 июл; 177 (14): 3240-3257. DOI: 10.1111 / bph.15046. Epub 2020 12 апреля PubMed

3va4 — Протеопедия, жизнь в 3D

Структурные особенности

Болезнь

[CHK2_HUMAN] Дефекты в CHEK2 связаны с синдромом Ли-Фраумени 2 (LFS2) [MIM: 609265]; фенотип семейного рака с высокой проникающей способностью, обычно связанный с наследственными мутациями в p53 / TP53. [1] Дефекты в CHEK2 могут быть причиной предрасположенности к раку простаты (PC) [MIM: 176807]. Это злокачественное новообразование, возникающее в тканях простаты. Большинство видов рака простаты — это аденокарциномы, которые развиваются в ацинусах протоков простаты. Другие редкие гистопатологические типы рака простаты, которые встречаются примерно у 5% пациентов, включают мелкоклеточную карциному, муцинозную карциному, протоковую карциному предстательной железы, переходно-клеточную карциному, плоскоклеточную карциному, базальноклеточную карциному, аденоидно-кистозную карциному (базалоидную), перстневидную клетку карцинома и нейроэндокринная карцинома.Дефекты CHEK2 обнаруживаются у некоторых пациентов с остеогенной саркомой (OSRC) [MIM: 259500]. Дефекты в CHEK2 являются причиной предрасположенности к раку груди (РМЖ) [MIM: 114480]. Распространенное злокачественное новообразование, происходящее из эпителиальной ткани груди. Новообразования груди можно отличить по их гистологическому типу. Инвазивная протоковая карцинома на сегодняшний день является наиболее распространенным типом. Рак груди этиологически и генетически неоднороден. На важные генетические факторы указывают семейное происхождение и двустороннее поражение.Мутации более чем в одном локусе могут быть задействованы в разных семьях или даже в одном и том же случае. Примечание. Варианты CHEK2 связаны с предрасположенностью к раку груди и вносят значительный вклад в развитие семейного рака груди (PubMed: 12094328). [2] [3]

Функция

[MDC1_MOUSE] Требуется для остановки клеточного цикла, опосредованной контрольной точкой, в ответ на повреждение ДНК как в фазе S, так и в фазе G2 / M клеточного цикла. Может служить каркасом для привлечения белков репарации ДНК и передачи сигнала к дискретным очагам повреждения ДНК, отмеченным фосфорилированием «Ser-139» гистона h3AFX.Также требуется для последующих событий после рекрутирования этих белков. К ним относятся фосфорилирование и активация киназ ATM, CHEK1 и CHEK2, а также стабилизация TP53 и апоптоз. ATM и CHEK2 также могут быть независимо активированы параллельным путем, опосредованным TP53BP1 (по сходству). [CHK2_HUMAN] Серин / треонин-протеинкиназа, которая необходима для остановки клеточного цикла, опосредованной контрольными точками, активации репарации ДНК и апоптоза в ответ на присутствие двухцепочечных разрывов ДНК.Также может отрицательно регулировать развитие клеточного цикла во время невозмущенных клеточных циклов. После активации фосфорилирует многочисленные эффекторы предпочтительно по консенсусной последовательности [L-X-R-X-X-S / T]. Регулирует остановку контрольной точки клеточного цикла посредством фосфорилирования CDC25A, CDC25B и CDC25C, подавляя их активность. Ингибирование активности фосфатазы CDC25 приводит к усилению ингибирующего фосфорилирования тирозина комплексов CDK-циклин и блокирует развитие клеточного цикла. Может также фосфорилировать NEK6, который участвует в остановке клеточного цикла G2 / M.Регулирует репарацию ДНК посредством фосфорилирования BRCA2, усиливая ассоциацию RAD51 с хроматином, что способствует репарации ДНК путем гомологичной рекомбинации. Также стимулирует транскрипцию генов, участвующих в репарации ДНК (включая BRCA2) за счет фосфорилирования и активации фактора транскрипции FOXM1. Регулирует апоптоз за счет фосфорилирования p53 / TP53, MDM4 и PML. Фосфорилирование p53 / TP53 по «Ser-20» с помощью CHEK2 может облегчить ингибирование MDM2, что приведет к накоплению активного p53 / TP53.Фосфорилирование MDM4 может также снизить деградацию p53 / TP53. Также контролирует транскрипцию проапоптотических генов посредством фосфорилирования фактора транскрипции E2F1. Супрессор опухолей, он также может выполнять независимую от повреждений ДНК функцию сборки митотического веретена путем фосфорилирования BRCA1. Его отсутствие может быть причиной хромосомной нестабильности, наблюдаемой в некоторых раковых клетках. [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] [12] [13] [14] [15] [16] [17] [18] [19] [20]

Резюме публикации из PubMed

MDC1 млекопитающих взаимодействует с CHK2 в регуляции индуцированной повреждением ДНК контрольной точки S-фазы и апоптоза, который управляется ассоциацией MDC1-FHA и CHK2-pThr68.Однако сообщалось о различных лигандных специфичностях MDC1-FHA, и структура недоступна. Здесь мы сообщаем о кристаллических структурах MDC1-FHA и его комплекса с пептидом CHK2, содержащим pThr68. В отличие от других доменов FHA, MDC1-FHA существует как собственный димер в растворе и в кристаллах. Структурный анализ и анализ связывания подтверждают специфичность лиганда pThr + 3 и обеспечивают структурное понимание взаимодействия MDC1-CHK2.

Структурное определение связывания домена MDC1-FHA с помощью CHK2-pThr68., Wu HH, Wu PY, Хуанг KF, Kao YY, Tsai MD Biochemistry. 2012 17 января; 51 (2): 575-7. Epub 2012 6 января. PMID: 22211259 [21]

Из базы данных MEDLINE® / PubMed® Национальной медицинской библиотеки США.

Список литературы

  1. ↑ Lee SB, Kim SH, Bell DW, Wahrer DC, Schiripo TA, Jorczak MM, Sgroi DC, Garber JE, Li FP, Nichols KE, Varley JM, Godwin AK, Shannon KM, Harlow E, Haber DA. Дестабилизация CHK2 миссенс-мутацией, связанной с синдромом Ли-Фраумени.Cancer Res. 2001 15 ноября; 61 (22): 8062-7. PMID: 11719428
  2. ↑ Vahteristo P, Bartkova J, Eerola H, Syrjakoski K, Ojala S, Kilpivaara O, Tamminen A, Kononen J, Aittomaki K, Heikkila P, Holli K, Blomqvist C, Bartek J, Kallioniemi OP, NevanK2 генетический A. вариант, способствующий значительной части семейного рака груди. Am J Hum Genet. 2002 август; 71 (2): 432-8. Epub 2002, 28 июля. PMID: 12094328 doi: 10.1086 / 341943
  3. ↑ Лю И, Ляо Дж, Сюй Ю, Чен У, Лю Д, Оуян Т, Ли Дж, Ван Т, Фан З, Фан Т, Линь Б, Сюй Х, Се Й.Повторяющаяся мутация CHEK2 p.h471Y связана с риском рака груди у китаянок. Hum Mutat. 2011 26 мая. Doi: 10.1002 / humu.21538. PMID: 21618645 DOI: 10.1002 / humu.21538
  4. ↑ Мацуока С., Хуанг М., Элледж С.Дж. Связь ATM с регуляцией клеточного цикла протеинкиназой Chk2. Наука. 1998 4 декабря; 282 (5395): 1893-7. PMID: 9836640
  5. ↑ Blasina A, de Weyer IV, Laus MC, Luyten WH, Parker AE, McGowan CH. Человеческий гомолог киназы контрольной точки Cds1 непосредственно ингибирует фосфатазу Cdc25.Curr Biol. 1999, 14 января; 9 (1): 1-10. PMID: 9889122
  6. ↑ Браун А.Л., Ли СН, Шварц Дж. К., Митику Н., Пивница-Вормс Х., Чунг Дж. Х. Связанная с Cds1 киназа человека, которая функционирует ниже белка ATM в клеточном ответе на повреждение ДНК. Proc Natl Acad Sci U S. A. 1999 30 марта; 96 (7): 3745-50. PMID: 10097108
  7. ↑ Lee JS, Collins KM, Brown AL, Lee CH, Chung JH. hCds1-опосредованное фосфорилирование BRCA1 регулирует ответ на повреждение ДНК. Природа. 2000 9 марта; 404 (6774): 201-4. PMID: 10724175 DOI: 10.1038/35004614
  8. ↑ Falck J, Mailand N, Syljuasen RG, Bartek J, Lukas J. Путь контрольной точки ATM-Chk2-Cdc25A защищает от синтеза радиоустойчивой ДНК. Природа. 2001 12 апреля; 410 (6830): 842-7. PMID: 11298456 DOI: 10.1038 / 35071124
  9. ↑ Ян С., Го Ц., Биси Дж. Э., Ким М.К. PML-зависимый апоптоз после повреждения ДНК регулируется киназой контрольной точки hCds1 / Chk2. Nat Cell Biol. 2002 ноя; 4 (11): 865-70. PMID: 12402044 DOI: 10.1038 / ncb869
  10. ↑ Louria-Hayon I, Grossman T, Sionov RV, Alsheich O, Pandolfi PP, Haupt Y.Белок промиелоцитарного лейкоза защищает p53 от опосредованного Mdm2 ингибирования и деградации. J Biol Chem. 29 августа 2003; 278 (35): 33134-41. Epub 2003 16 июня. PMID: 12810724 doi: 10.1074 / jbc.M301264200
  11. ↑ Стивенс К., Смит Л., La Thangue NB. Chk2 активирует E2F-1 в ответ на повреждение ДНК. Nat Cell Biol. 2003 Май; 5 (5): 401-9. PMID: 12717439 DOI: 10.1038 / ncb974
  12. ↑ Lou Z, Minter-Dykhouse K, Wu X, Chen J. MDC1 связан с активированным CHK2 в путях ответа на повреждение ДНК млекопитающих. Природа.2003 27 февраля; 421 (6926): 957-61. PMID: 12607004 doi: 10.1038 / nature01447
  13. ↑ Chen L, Gilkes DM, Pan Y, Lane WS, Chen J. ATM и Chk2-зависимое фосфорилирование MDMX способствуют активации p53 после повреждения ДНК. EMBO J. 2005 Oct 5; 24 (19): 3411-22. Epub 15 сентября 2005 г. PMID: 16163388 doi: 10.1038 / sj.emboj.7600812
  14. ↑ Inoue Y, Kitagawa M, Taya Y. Фосфорилирование pRB по Ser612 с помощью Chk1 / 2 приводит к комплексу между pRB и E2F-1 после повреждения ДНК. EMBO J. 18 апреля 2007; 26 (8): 2083-93. Epub 2007 22 марта.PMID: 17380128 DOI: 10.1038 / sj.emboj.7601652
  15. ↑ Касс Е.М., Ан Дж., Танака Т., Фрид-Пастор В.А., Кизер С., Привес С. Стабильность киназы контрольной точки 2 регулируется посредством фосфорилирования серина 456. J Biol Chem. 2007 октября 12; 282 (41): 30311-21. Epub 21 августа 2007 г. PMID: 17715138 doi: 10.1074 / jbc.M704642200
  16. ↑ Tan Y, Raychaudhuri P, Costa RH. Chk2 опосредует стабилизацию фактора транскрипции FoxM1 для стимуляции экспрессии генов репарации ДНК. Mol Cell Biol. 2007 Февраль; 27 (3): 1007-16. Epub 2006 13 ноября.PMID: 17101782 DOI: 10.1128 / MCB.01068-06
  17. ↑ Lee MY, Kim HJ, Kim MA, Jee HJ, Kim AJ, Bae YS, Park JI, Chung JH, Yun J. Nek6 участвует в остановке клеточного цикла в фазе G2 / M посредством фосфорилирования, вызванного повреждением ДНК. Клеточный цикл. 2008 1 сентября; 7 (17): 2705-9. Epub 3 сентября 2008 г. PMID: 18728393
  18. ↑ Lovly CM, Yan L, Ryan CE, Takada S, Piwnica-Worms H. Регуляция убиквитинирования Chk2 и передачи сигналов посредством аутофосфорилирования серина 379. Mol Cell Biol. Октябрь 2008; 28 (19): 5874-85. DOI: 10.1128 / MCB.00821-08. Epub 2008 июл, 21. PMID: 18644861 doi: 10.1128 / MCB.00821-08
  19. ↑ Bahassi EM, Ovesen JL, Riesenberg AL, Bernstein WZ, Hasty PE, Stambrook PJ. Киназы контрольной точки Chk1 и Chk2 регулируют функциональные ассоциации между hBRCA2 и Rad51 в ответ на повреждение ДНК. Онкоген. 26 июня 2008 г .; 27 (28): 3977-85. DOI: 10.1038 / onc.2008.17. Epub 3 марта 2008 г. PMID: 18317453 doi: 10.1038 / onc.2008.17
  20. ↑ Штольц А., Эртих Н., Кениц А., Фогель К., Шнайдер В., Фриц Б., Якоб Р., Диттмар Г., Вайхерт В., Петерсен I, Бастианс Х.Путь опухолевого супрессора CHK2-BRCA1 обеспечивает хромосомную стабильность в соматических клетках человека. Nat Cell Biol. 2010 Май; 12 (5): 492-9. DOI: 10,1038 / NCB2051. Epub 4 апреля 2010 г. PMID: 20364141 DOI: 10.1038 / ncb2051
  21. ↑ Wu HH, Wu PY, Huang KF, Kao YY, Tsai MD. Структурное определение связывания домена MDC1-FHA с помощью CHK2-pThr68. Биохимия. 2012 17 января; 51 (2): 575-7.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

    2024 © Все права защищены.